目的 建立全反式维甲酸(all-trans retinoic acid,ATRA)诱导神经管畸形(neural tube defects,NTDs)鼠神经干细胞无血清培养法,了解神经管发育过程中神经干细胞的变化规律及叶酸的干预作用,并观察H3K27me3在NTDs中表达的变化.方法 分别取妊娠第15.5天的正常、实验及叶酸干预后的胎鼠神经管分离培养神经干细胞,采用免疫细胞化学鉴定;用神经球计数、直径测量及MTT法检测各组神经干细胞生长情况,免疫细胞化学法分析各组细胞分化情况,Western blot法测定H3K27me3在各组细胞中的表达情况.结果 正常组、实验组和叶酸干预组,200倍镜下取5个视野计数神经球数,其平均值分别为(29.4±2.07)、(17.8±2.17)和(23.4±1.52)个,3组间差异有统计学意义(P＜0.05);正常组、实验组和叶酸干预组神经干细胞直径的平均值分别为(140.2±4.82)、(106.6±3.85)和(121.8±4.09) μm,3组间差异有统计学意义(P＜0.05);正常组、实验组和叶酸干预组神经于细胞诱导分化后Nestin表达量分别为(6±0.9)％、(32±3)％、(21±4)％(P＜0.05);实验组中H3K27me3明显高表达.结论 ATRA致NTDs的发生与神经干细胞的数目减少、增殖分化抑制及H3K27me3的高表达密切相关.
作者：鲁峰刚；杜勇；周长城；翟思凡
来源：宁夏医科大学学报 2016 年 38卷 3期
