①目的构建HIV-1 SF2株跨膜蛋白GP41第二优势表位簇基因的原核高效表达克隆,探讨提高原核表达的途径.②方法根据密码子的兼并性,利用PCR-定点突变技术扩增、改造目的基因片段,将其与原核表达载体pGEX4T-2经EcoRI和SalI双酶切、连接,重组质粒pGEX4T-2/SE转化表达宿主菌DH5α,经IPTG诱导表达出目的融合蛋白,经SDS-PAGE与Western-Blot鉴定.③结果获得了高效表达HIV-1 GP41第二优势表位谷胱甘肽S-转移酶融合蛋白的重组菌;Western-Blot鉴定表明,重组蛋白具有良好的抗原性和特异性.④结论在原核表达体系中可以高效表达HIV-1 GP41第二优势表位簇.
作者:李文利;钱冬萌;王斌
来源:青岛大学医学院学报 2003 年 39卷 1期