目的 获得骨形态发生蛋白(BMP-9)基因并进行基因读码框架的克隆.方法 自正常成人肝组织提取总RNA,一步法RT-PCR扩增BMP-9,扩增产物经过胶回收及酶切后,克隆人高效真核表达质粒pcDNA4/HisMax,构建重组表达载体.结果 RT-PCR扩增获得约1.3kb大小的产物,经限制性酶切分析和DNA测序,证实为人BMP-9基因的完整开放读码框架.重组载体表达读码序列正确.结论 正常成人肝组织总RNA经一步法RT-PCR,能够对BMP-9基因的开放读码框架进行完整有效的筛选.BMP-9开放读码框架的完整克隆为其在骨、内分泌和神经系统等多能作用的转基因实验研究提供了基础.
作者:杨堃;刘相萍;隋爱华;吴力群;吕振华
来源:青岛大学医学院学报 2007 年 43卷 6期