目的 构建真核表达载体pcDNA3.1-mAFP,观察其在293肿瘤细胞中的表达情况.方法 从Hepa1-6 小鼠肝癌细胞中提取总RNA,设计特异性引物,通过RT-PCR法扩增小鼠甲胎蛋白(mAFP)基因编码区全长序列,测序确认后,插入到pcDNA3.1真核表达载体中,双酶切鉴定.用Lipofectamine脂质体将构建的重组载体转染293肿瘤细胞,检测AFP蛋白在293细胞中的表达情况.结果 成功克隆了mAFP基因编码区全长序列,构建出重组真核表达载体pcDNA3.1-mAFP,脂质体转染后可检测到mAFP基因在293细胞中的表达.结论 该研究成功构建了重组pcDNA3.1-mAFP真核表达载体,为进一步开展原发性肝癌的靶向性基因治疗奠定了基础.
作者:匡志鹏;谢裕安;梁安民;罗小玲;吴继宁
来源:中国现代医学杂志 2007 年 17卷 9期