目的 探讨RNA干扰survivin基因对HepG2细胞凋亡及化疗敏感性的影响.方法 构建针对HepG2细胞 survivin基因的 shRNA真核表达载体pshRNA-survivin-387.将HepG2细胞接种于6孔板中,分为空白对照组(不加药物)、阴性对照组(每孔加pshRNA-survivin-NC为3.2 μg)、低浓度转染组(每孔加pshRNA-survivin-387为0.8 μg)、中浓度转染组(每孔加pshRNA-survivin-387为1.6 μg)、高浓度转染组(每孔加pshRNA-survivin-387为3.2 μg),作用48 h后收集细胞,流式细胞术检测各组细胞凋亡指数;将HepG2细胞接种于96孔板中,分为3组:空白对照组(不加药物)、阴性对照组(每孔加pshRNA-survivin-NC为0.2 μg)、实验组(每孔加 pshRNA-survivin-387为0.2 μg),四甲基偶氮唑蓝法检测各组细胞分别与顺铂(2.0 mg/L)作用24、36、48、60 h后的增殖水平.结果 各浓度转染组细胞的凋亡指数明显高于空白对照组和阴性对照组(F=228.87,q=10.45~38.21,P<0.01),高浓度转染组细胞凋亡指数高于低浓度转染组(q=23.99,P<0.01).顺铂对实验组细胞的细胞抑制率在24、36、48、60 h时明显高于空白对照组和阴性对照组(F=235.88~910.86,q=28.04~52.28,P<0.01).结论 pshRNA-survivin-387转染能诱导肝癌细胞的凋亡,增强肝癌细胞对顺铂化疗的敏感性.
作者:孙瑶;雷炜
来源:齐鲁医学杂志 2010 年 25卷 4期