目的:构建含多药耐药基因MDR1的短发夹状RNA(short hairpinRNA,shRNA)表达质粒,观察对肝癌耐药细胞Bel-7402/R的MDR1 mRNA的抑制作用.方法:利用分子克隆技术,将含MDR1的双链DNA,与经双酶切后的载体PGE-1连接,构建pshRNA MDR1重组质粒,在脂质体的介导下转染肝癌耐药细胞株Bel-7402/R;RT-PCR分析MDR1 mRNA的表达,MTT法检测细胞对药物的敏感性,流式细胞仪检测细胞内罗丹明123(Rh123)的潴留和P-gp的表达.结果:PCR和DNA测序证实了表达质粒构建成功,并能明显地抑制MDR1 mRNA的表达;对盐酸表柔比星和顺铂的半数抑制浓度IC50明显降低,P＜0.05;P-gp的表达阳性率降低了57.3
作者：胡礼仪；周新；张有顺；戴宗晴；黄玲；王菊
来源：肿瘤防治杂志 2004 年 11卷 11期
