目的:探讨RNA干扰(RNAi)对结肠癌SW480细胞人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因的抑制效应.方法:化学合成靶向于hTERT基因的4个小分子干扰RNA(siRNA)序列,用阳离子脂质体为载体转染SW480细胞,分为siRNA1～4、siRNA阴性对照和空白对照6组.通过RT-PCR和蛋白质印迹法分别检测结肠癌细胞转染后细胞hTERT mRNA 和蛋白水平,并用MTS法检测细胞生长增殖.结果:siRNA1～4组hTERT mRNA相对表达量分别为0.54±0.18、0.56±0.19、0.46±0.10和0.84±0.18,端粒酶相对活性分别为0.57±0.18、0.56±0.19、0.09±0.08和0.70±0.19,siRNA1～4组hTERT蛋白相对表达量分别为0.41±0.18、0.45±0.17、0.08±0.07和0.82±0.16,其中siR NA1～3组的hTERTmRNA表达量、端粒酶活性和蛋白表达量与空白对照组的差异有统计学意义,P＜0.05.SW480细胞在转染后48 h时的细胞增长平均抑制率分别为42.14％、39.12％、48.05％和35.85％.提示不同 siRNA序列对SW480的转染效率不同,其中siRNA3组能显著下调hTERT mRNA和蛋白的表达水平,并能抑制端粒酶活性和促进SW480细胞凋亡,与空白对照组比较均差异有统计学意义,P＜0.01.结论:靶向hTERT的RNAi能明显抑制SW480的增殖,hTERT可作为结肠癌基因治疗的靶点.

作者：王国玉；夏伟；张玉娜；李艳；朱雪萍；王瑛；倪晶

来源：中华肿瘤防治杂志 2011 年 18卷 21期