目的:探讨siRNA对胃癌BGC823和MGC803细胞中Cullin1 (Cul1)基因表达、细胞增殖的影响及其分子作用机制.方法:体外化学合成Cul1 siRNA序列,在siLentFect Lipid Reagent介导下转染2种胃癌细胞.蛋白质印迹法检测Cul1、Cyclins和CDK抑制剂蛋白表达,CCK8法检测细胞增殖活性,流式细胞术检测细胞周期.结果:转染Cul1 siR-NA后胃癌BGC823和MGC803细胞中Cul1蛋白表达分别下调39%和84%,Cyclin D1下调59%和62%,Cyclin E下调47%和54%,而p27蛋白表达上调52%和23%,但p21蛋白表达无明显变化.Cul1干涉后24h2种胃癌细胞的增殖能力下降(P<0.01),48和72 h下降更明显,P<0.01.Cul1干涉后3和6 hG1期细胞比例较对照组下降缓慢(P<0.01),而Sub-G1期Cul1干涉组与对照组差异无统计学意义.结论:Cul1 siRNA可有效的干涉胃癌BGC823和MGC803细胞中Cul1基因的表达,Cul1干涉后可能通过影响Cyclins和CDK抑制剂蛋白表达从而使细胞周期停滞在G1期,最终能明显抑制胃癌细胞的增殖.
作者:雍红梅;白津;洪雯;郑骏年
来源:中华肿瘤防治杂志 2012 年 19卷 20期