目的:探讨Grb2协同结合蛋白2(Grb2 binding protein-2,Gab2)对人肺癌A549细胞体外迁移和侵袭的影响及其机制.方法:将质粒pGCsilencerU6/GFP/Neo-RNAi-Gab2#1、pGCsilencerU6/GFP/Neo-RNAi-Gab2#2和对照空载质粒转染到A549细胞中,建立Gab2低表达的siGab2/A549#1、siGab2/A549#2细胞和对照SCR/A549细胞.应用RT-PCR和蛋白质印迹法检测小分子干扰RNA(siRNA)干扰Gab2表达后的基因和蛋白表达水平.趋化运动实验检测细胞的迁移能力；体外侵袭实验检测细胞的侵袭能力；蛋白质印迹法检测siRNA干扰Gab2表达后,A549细胞在胰岛素样生长因子-1(insulin like growth factor-1,IGF-1)刺激下基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)的表达及磷酸化Akt(pAkt)、磷酸化人雷帕霉素靶蛋白(phosphorylated mammalian target of rapamycin,pmTOR)的活化情况.结果:siRNA干扰Gab2表达后,RT-PCR测定A549细胞Gab2 mRNA相对表达量为1.340±0.009,Scr/A549细胞为1.201士0.074,siGab2# 1/A549细胞为0.315±0.008,siGab2# 2/A549细胞为0.289±0.007.蛋白印迹法检测A549细胞Gab2蛋白表达量为0.205±0.003,Sct/A549细胞为0.241±0.004,siGab2# 1/A549细胞为0.128±0.002,s

作者：史立宏；陶蓉；王云甲；张秀荣；孙秀宁；周风华；罗荣城；张宝刚

来源：中华肿瘤防治杂志 2013 年 20卷 16期