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目的 观察槲皮素孵育后HL-60细胞腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)、Cox-2表达和线粒体凋亡信号转导通路Bcl-2、Bax和Caspase-3表达,探讨槲皮素抑制HL-60细胞增殖及诱导凋亡可能机制.方法 Hoechst33342染色及流式细胞仪检测槲皮素孵育HL-60细胞48 h后细胞凋亡情况.蛋白质印迹法检测HL-60细胞及人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC) LKB1、p-AMPK和Cox-2蛋白的表达.不同浓度槲皮素与HL-60细胞共同孵育48 h后,蛋白质印迹法检测细胞LKB1、p-AMPK、Cox-2、Bcl-2、Bax和Caspase-3的表达.不同浓度AMPK抑制剂Compound c孵育HL-60细胞48 h后蛋白质印迹法检测p-AMPK的表达.50和100 μmol/L槲皮素与25 μmol/L Compound c共同孵育HL-60 48 h后检测LKB1、p-AMPK和Cox-2蛋白表达.结果 HL-60细胞凋亡率检测结果显示,槲皮素0μmol/L凋亡率为(2.40±2.31)%,25 μmol/L为(8.20±0.92)%,50 μmol/L为(15.06±1.87)%,100 μmol/L为(19.29±0.91)%,F=8.48,P=0.01.人PBMC中p-AMPK的表达高于HL-60,P<0.001;人PBMC中Cox-2的表达低于HL-60,P<0.001.50和100 μmol/L槲皮素组p-AMPK和Caspase-3表达增加,P值均<0.05;50和100 μmol/L槲皮素组Cox-2和Bcl-2表达下降,P值均<0.01

作者:肖洁;牛国敏;尹松梅;谢双峰;李益清;聂大年;马丽萍;王秀菊;吴裕丹

来源:中华肿瘤防治杂志 2014 年 21卷 21期

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肖洁;牛国敏;尹松梅;谢双峰;李益清;聂大年;马丽萍;王秀菊;吴裕丹
来源:
中华肿瘤防治杂志 2014 年 21卷 21期
标签:
白血病 槲皮素 腺苷酸活化蛋白激酶 凋亡 leukemia quercetin AMP-activated protein kinase apoptosis
目的 观察槲皮素孵育后HL-60细胞腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)、Cox-2表达和线粒体凋亡信号转导通路Bcl-2、Bax和Caspase-3表达,探讨槲皮素抑制HL-60细胞增殖及诱导凋亡可能机制.方法 Hoechst33342染色及流式细胞仪检测槲皮素孵育HL-60细胞48 h后细胞凋亡情况.蛋白质印迹法检测HL-60细胞及人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC) LKB1、p-AMPK和Cox-2蛋白的表达.不同浓度槲皮素与HL-60细胞共同孵育48 h后,蛋白质印迹法检测细胞LKB1、p-AMPK、Cox-2、Bcl-2、Bax和Caspase-3的表达.不同浓度AMPK抑制剂Compound c孵育HL-60细胞48 h后蛋白质印迹法检测p-AMPK的表达.50和100 μmol/L槲皮素与25 μmol/L Compound c共同孵育HL-60 48 h后检测LKB1、p-AMPK和Cox-2蛋白表达.结果 HL-60细胞凋亡率检测结果显示,槲皮素0μmol/L凋亡率为(2.40±2.31)%,25 μmol/L为(8.20±0.92)%,50 μmol/L为(15.06±1.87)%,100 μmol/L为(19.29±0.91)%,F=8.48,P=0.01.人PBMC中p-AMPK的表达高于HL-60,P<0.001;人PBMC中Cox-2的表达低于HL-60,P<0.001.50和100 μmol/L槲皮素组p-AMPK和Caspase-3表达增加,P值均<0.05;50和100 μmol/L槲皮素组Cox-2和Bcl-2表达下降,P值均<0.01