目的 p53及p16基因是肺腺癌的两种重要的驱动基因,但其在肺腺癌发生发展中的作用尚不明确.本研究探讨外源性突变型p53(p53mut)、野生型p53(p53wt)和p16基因过表达对人肺腺癌细胞株H1299生物学功能的影响.方法 构建真核表达载体pIRES2-EGFP-p53mut、pIRES2-EGFP-p53wt和pIRES2-EGFP-p16,将H1299细胞分为空白对照组、阴性对照组和转染组(p53mut转染组、p53wt转染组、p53wt和p16联合转染组),空白对照组只加转染试剂,阴性对照组转染空载体,转染组转染含目的基因的过表达载体.蛋白质印迹法验证质粒载体转染效果,细胞增殖检测试剂盒8 (cell counting kit 8,CCK8)、划痕试验、Transwell小室侵袭实验分别检测转染前后细胞增殖、迁移及侵袭能力的变化,流式细胞术检测转染前后细胞周期和凋亡的变化.结果 真核表达载体质粒经测序鉴定证明构建正确.蛋白质印迹法证实,空白对照组及阴性对照组的H1299细胞不表达p53和p16蛋白.转染组的H1299细胞成功过表达目的基因(p53mut、p53wt及p16).CCK8实验提示,空白对照组与阴性对照组在细胞增殖能力上差异无统计学意义(P＞0.05),p53mut转染组细胞增殖能力增强,p53wt转染组及p53wt、p16共转染组细胞的增殖能力减弱,且以后者下降更为明显,P＜0.001.划痕试验提示,空白对照组与阴性对
作者：卞春安；蒋琰华；陆世民；许林；李忠佑
来源：中华肿瘤防治杂志 2018 年 25卷 5期
