目的 探讨白花丹素对人骨肉瘤细胞凋亡的调控作用及相关机制,为其临床治疗骨肉瘤提供新参考.方法 采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)确定白花丹素抑制人骨肉瘤MG63和HOS细胞半抑制浓度(IC50).转染小干扰RNA(siR-NA)沉默MG63和HOS细胞中血红素氧合酶-1(HO-1)表达,转染72 h后利用嘌呤霉素(2μg/mL)筛选细胞稳定株,采用蛋白质印迹法验证转染效率.MG63和HOS细胞白花丹素组分别加入上述测定的IC50浓度白花丹素,对照组不予特殊干预.24 h后蛋白质印迹法检测HO-1蛋白表达;进一步将对照组MG63细胞及转染HO-1-siRNA的MG63细胞稳定株再行上述干预,采用蛋白质印迹法检测HO-1、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)和Bax蛋白表达;采用流式细胞术检测各组细胞凋亡率.结果 CCK-8结果显示,白花丹素诱导MG63和HOS细胞IC50浓度分别为14.32和12.21μmol/L.蛋白质印迹法结果显示,HOS细胞中对照组、shRNA-HO-1组和Mock组HO-1蛋白表达量分别为0.57±0.03、0.35±0.04和0.55±0.03,F=37.311,P<0.001;shRNA-HO-1组HO-1蛋白表达量低于对照组和Mock组,均P<0.001,表明沉默后蛋白表达降低.MG63细胞中对照组、shRNA-HO-1组和Mock组HO-1蛋白表达量分别为0.38±0.02、0.25±0.02和0.39±0.04,F=23.853,P<0.001;shRNA-HO-1组HO-1蛋白表达量低于
作者:刘宗超;高海明;付至江;韩云炜;马川
来源:中华肿瘤防治杂志 2021 年 28卷 21期