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目的 探讨miR-361-5p对骨肉瘤细胞放射敏感性的影响及其可能的下游调控机制.方法 构建放射抵抗的骨肉瘤细胞系HOS-R,利用RT-qPCR检测miR-361-5p在HOS和HOS-R细胞中的表达情况;上调或下调miR-361-5p表达、敲低FoxM1,以克隆形成实验和流式细胞术检测miR-361-5p对HOS-R细胞存活率和细胞凋亡率,通过双荧光素报告基因实验和蛋白免疫印迹实验检测miR-361-5p与FoxM1的靶向关系.构建FoxM1过表达载体,采用克隆形成实验和流式细胞术检测miR-361-5p通过FoxM1对骨肉瘤细胞放射敏感性的影响.结果 RT-qPCR检测结果显示,miR-361-5p在HOS-R细胞中低表达.克隆形成实验和流式细胞术检测结果显示,过表达miR-361-5p可显著降低HOS-R细胞的生存率,增加其细胞凋亡率,与敲低FoxM1结果相反.双荧光报告基因实验证实miR-361-5p靶向负性调控FoxM1表达,FoxM1可逆转miR-361-5p对细胞HOS-R放射敏感性的促进作用.结论 miR-361-5p可负调控FoxM1,并影响骨肉瘤细胞的放射敏感性.

作者:丁帅;高延征;张广泉;陈书连;曹臣;李白羽

来源:中华放射肿瘤学杂志 2019 年 28卷 5期

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作者:
丁帅;高延征;张广泉;陈书连;曹臣;李白羽
来源:
中华放射肿瘤学杂志 2019 年 28卷 5期
标签:
骨肉瘤细胞系 基因表达调控 放射敏感性 Osteosarcoma cell line Gene expression regulation Radiosensitivity
目的 探讨miR-361-5p对骨肉瘤细胞放射敏感性的影响及其可能的下游调控机制.方法 构建放射抵抗的骨肉瘤细胞系HOS-R,利用RT-qPCR检测miR-361-5p在HOS和HOS-R细胞中的表达情况;上调或下调miR-361-5p表达、敲低FoxM1,以克隆形成实验和流式细胞术检测miR-361-5p对HOS-R细胞存活率和细胞凋亡率,通过双荧光素报告基因实验和蛋白免疫印迹实验检测miR-361-5p与FoxM1的靶向关系.构建FoxM1过表达载体,采用克隆形成实验和流式细胞术检测miR-361-5p通过FoxM1对骨肉瘤细胞放射敏感性的影响.结果 RT-qPCR检测结果显示,miR-361-5p在HOS-R细胞中低表达.克隆形成实验和流式细胞术检测结果显示,过表达miR-361-5p可显著降低HOS-R细胞的生存率,增加其细胞凋亡率,与敲低FoxM1结果相反.双荧光报告基因实验证实miR-361-5p靶向负性调控FoxM1表达,FoxM1可逆转miR-361-5p对细胞HOS-R放射敏感性的促进作用.结论 miR-361-5p可负调控FoxM1,并影响骨肉瘤细胞的放射敏感性.