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目的 探讨siRNA沉默结肠癌转移相关基因1(MACC1)表达对耐药性非小细胞肺癌细胞株A549增殖及侵袭的影响.方法 培养非耐药性和耐药性非小细胞肺癌A549细胞,应用RT-PCR技术检测MACC1 mRNA的表达水平;通过化学合成特异性siRNA,与阳离子脂质体Lipofectamine 2000形成复合体,转染耐药性A549细胞,RT-PCR检测转染效果;继续顺铂药物处理耐药性A549细胞,MTT法检测细胞增殖抑制率;Hoechst33258染色法观察siMACC1后耐药性A549细胞的凋亡形态;Transwell法检测siMACC1后耐药性A549细胞迁移能力;Western blot法检测siMACC1后耐药性A549细胞周期蛋白E-cadherin和N-cadherin的表达水平.结果 与耐药性A549细胞组比较,非耐药性A549细胞组中MACC1 mRNA表达量显著下降(P<0.05).与siRNA NC耐药性A549细胞组比较,siRNA MACC1耐药性A549细胞组中MACC1 mRNA表达量显著降低(P<0.05),细胞增殖抑制率上升(P<0.05);Hoechst 33258细胞染色结果表明siRNA MACC1耐药性A549细胞组发生细胞皱缩,细胞核聚集,细胞形态学呈现细胞凋亡改变;Transwell实验表明MACC1基因沉默后,细胞迁移能力变弱;Western blot结果表明MACC1基因沉默后,与siRNA NC耐药性A549细胞组比较,siRNA MACC1耐药性A549细胞组中E-cadherin蛋白表达显著增加(P<0.05),N-cadh

作者:曹婷婷;万俊;冯永海;张旭

来源:热带医学杂志 2020 年 20卷 6期

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作者:
曹婷婷;万俊;冯永海;张旭
来源:
热带医学杂志 2020 年 20卷 6期
标签:
MACC1 耐药性非小细胞肺癌 顺铂
目的 探讨siRNA沉默结肠癌转移相关基因1(MACC1)表达对耐药性非小细胞肺癌细胞株A549增殖及侵袭的影响.方法 培养非耐药性和耐药性非小细胞肺癌A549细胞,应用RT-PCR技术检测MACC1 mRNA的表达水平;通过化学合成特异性siRNA,与阳离子脂质体Lipofectamine 2000形成复合体,转染耐药性A549细胞,RT-PCR检测转染效果;继续顺铂药物处理耐药性A549细胞,MTT法检测细胞增殖抑制率;Hoechst33258染色法观察siMACC1后耐药性A549细胞的凋亡形态;Transwell法检测siMACC1后耐药性A549细胞迁移能力;Western blot法检测siMACC1后耐药性A549细胞周期蛋白E-cadherin和N-cadherin的表达水平.结果 与耐药性A549细胞组比较,非耐药性A549细胞组中MACC1 mRNA表达量显著下降(P<0.05).与siRNA NC耐药性A549细胞组比较,siRNA MACC1耐药性A549细胞组中MACC1 mRNA表达量显著降低(P<0.05),细胞增殖抑制率上升(P<0.05);Hoechst 33258细胞染色结果表明siRNA MACC1耐药性A549细胞组发生细胞皱缩,细胞核聚集,细胞形态学呈现细胞凋亡改变;Transwell实验表明MACC1基因沉默后,细胞迁移能力变弱;Western blot结果表明MACC1基因沉默后,与siRNA NC耐药性A549细胞组比较,siRNA MACC1耐药性A549细胞组中E-cadherin蛋白表达显著增加(P<0.05),N-cadh