目的 探讨微小RNA-135a-5p(miR-135a-5p)通过调控SMAD家庭成员4(Smad4)表达而调控多囊卵巢综合征卵巢颗粒细胞的增殖及凋亡.方法 体外培养人卵巢颗粒细胞KGN与人正常卵巢上皮细胞IOSE80,实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)与蛋白免疫印迹法(Western blot)分别检测miR-135a-5p、Smad4的表达量;分别用anti-miR-con、anti-miR-135a-5p、anti-miR-135 a-5p与si-con、anti-miR-135a-5p与si-Smad4转染至卵巢颗粒细胞;甲基噻唑基四唑法(MTT)检测细胞增殖;平板克隆实验检测细胞克隆形成能力;流式细胞术检测细胞凋亡率;双荧光素酶报告实验检测过表达miR-135a-5p对野生型和突变型Smad4荧光素酶活性的影响;Western blot检测细胞周期蛋白D1 (Cyclin D1)、细胞周期依赖蛋白激酶2(CDK2)、B淋巴细胞瘤-2相关蛋白(Bax)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved caspase-3)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)的表达量.结果 与正常卵巢上皮细胞IOSE80比较,KGN细胞中miR-135a-5p的表达水平显著升高,Smad4 mRNA及蛋白表达量显著降低,差异均有统计学意义(P＜0.05).与anti-miR-con组比较,anti-miR-135a-5p组细胞活力显著降低,克隆形成数显著减少,细胞凋亡率显著升高,Cyclin D1、CDK2、Bcl-2蛋白水平显著降低,Bax、Cleaved caspase-

作者：杜静；吴日然；林秀峰；柯玩娜；高子轩

来源：热带医学杂志 2020 年 20卷 7期