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目的 探讨toll样受体4(TLR4)和干扰素-γ(IFN-γ)共激活的骨髓间充质干细胞(MSC)条件培养基对RAW264.7细胞的极化和炎症环境的影响.方法 收集脂多糖(LPS)和IFN-γ共处理MSC的条件培养基,观察其对M1、M2诱导条件下巨噬细胞系RAW264.7细胞极化影响.分别收集孵育24 h、48 h细胞,qPCR检测诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、精氨酸酶-1(Arg-1)和生长转化因子β(TGF-β)mRNA表达;Western blot检测iNOS、Arg-1的表达,差异有统计学意义(P<0.05),ELISA检测IL-6、IL-10表达.结果 M1诱导条件下,和单纯诱导组相比,MSC组和TLR4激活组可上调iNOS、IL-6、Arg-1、TGF-β表达,但TLR4激活组更明显上调M2相关基因Arg-1和TGF-β,且有下调TNF-α的趋势(P<0.05).在M2诱导条件下,和单纯诱导组相比,MSC组和TLR4激活组都上调iNOS、TNF-α、IL-6、Arg-1,差异有统计学意义(P<0.05),但TLR4激活组诱导iNOS和IL-6的作用更显著,差异有统计学意义(P<0.05),WB结果趋势与mRNA趋势一致.TLR4激活组在M2极化诱导条件下较未处理MSC更显著诱导炎症环境IL-10、IL-6产生,差异有统计学意义(P<0.05).结论 IFN-γ和LPS处理的MSC条件培养基可以显著调节M1和M2极化,并调节炎症环境细胞因子网络.

作者:陈芳;彭美;娘吉措毛;孙研航;雷俊霞

来源:热带医学杂志 2021 年 21卷 5期

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作者:
陈芳;彭美;娘吉措毛;孙研航;雷俊霞
来源:
热带医学杂志 2021 年 21卷 5期
标签:
骨髓间充质干细胞 RAW264.7 TLR4 干扰素-γ 极化
目的 探讨toll样受体4(TLR4)和干扰素-γ(IFN-γ)共激活的骨髓间充质干细胞(MSC)条件培养基对RAW264.7细胞的极化和炎症环境的影响.方法 收集脂多糖(LPS)和IFN-γ共处理MSC的条件培养基,观察其对M1、M2诱导条件下巨噬细胞系RAW264.7细胞极化影响.分别收集孵育24 h、48 h细胞,qPCR检测诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、精氨酸酶-1(Arg-1)和生长转化因子β(TGF-β)mRNA表达;Western blot检测iNOS、Arg-1的表达,差异有统计学意义(P<0.05),ELISA检测IL-6、IL-10表达.结果 M1诱导条件下,和单纯诱导组相比,MSC组和TLR4激活组可上调iNOS、IL-6、Arg-1、TGF-β表达,但TLR4激活组更明显上调M2相关基因Arg-1和TGF-β,且有下调TNF-α的趋势(P<0.05).在M2诱导条件下,和单纯诱导组相比,MSC组和TLR4激活组都上调iNOS、TNF-α、IL-6、Arg-1,差异有统计学意义(P<0.05),但TLR4激活组诱导iNOS和IL-6的作用更显著,差异有统计学意义(P<0.05),WB结果趋势与mRNA趋势一致.TLR4激活组在M2极化诱导条件下较未处理MSC更显著诱导炎症环境IL-10、IL-6产生,差异有统计学意义(P<0.05).结论 IFN-γ和LPS处理的MSC条件培养基可以显著调节M1和M2极化,并调节炎症环境细胞因子网络.