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目的探讨豆蔻明(cardamonin,CDN )对 RAW264.7小鼠巨噬细胞 Toll 样受体4(toll-like receptor 4,TLR4)/MyD88/NF-κB/iNOS信号通路的调节作用。方法利用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)处理 RAW264.7细胞建立炎性细胞模型并分组:正常对照组(Vehicle 组)、模型组(LPS组)和药物处理组(LPS +CDN 组);CCK-8方法检测细胞活力,Griess法检测细胞培养上清一氧化氮(nitric oxide,NO)含量,RT-PCR检测诱导型NO合成酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)、环氧化酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)、单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemotactic protein 1,MCP-1)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-ɑ、白介素(inter-leukin,IL)-1β和 IL-6的 mRNA 表达,Western blot检测 iN-OS、TLR4、髓样分化因子88(myeloid differentiation factor 88, MyD88)、核因子-κB(nuclear factor κB,NF-κB)phosphoryla-ted(p)-p65、inhibitor κBα(IκBα)和p-IκBα的蛋白表达。结果1~50μmol·L-1豆蔻明对RAW264.7细胞没有毒性,但可以剂量依赖性抑制LPS诱导的NO分泌和iNOS、COX-2、MCP-1、TNF-α、IL-1β及IL-6的mRNA表达,25μmol·L-1豆蔻明可下调LPS诱导的iNOS、

作者:邓超;任改艳;孙阿宁;罗晓平;王峥涛;窦薇

来源:中国药理学通报 2016 年 32卷 6期

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邓超;任改艳;孙阿宁;罗晓平;王峥涛;窦薇
来源:
中国药理学通报 2016 年 32卷 6期
标签:
RAW264.7细胞 TLR4 MyD88 NF-κB iNOS 豆蔻明 RAW264.7 cell TLR4 MyD88 NF-κB iNOS cardamonin
目的探讨豆蔻明(cardamonin,CDN )对 RAW264.7小鼠巨噬细胞 Toll 样受体4(toll-like receptor 4,TLR4)/MyD88/NF-κB/iNOS信号通路的调节作用。方法利用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)处理 RAW264.7细胞建立炎性细胞模型并分组:正常对照组(Vehicle 组)、模型组(LPS组)和药物处理组(LPS +CDN 组);CCK-8方法检测细胞活力,Griess法检测细胞培养上清一氧化氮(nitric oxide,NO)含量,RT-PCR检测诱导型NO合成酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)、环氧化酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)、单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemotactic protein 1,MCP-1)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-ɑ、白介素(inter-leukin,IL)-1β和 IL-6的 mRNA 表达,Western blot检测 iN-OS、TLR4、髓样分化因子88(myeloid differentiation factor 88, MyD88)、核因子-κB(nuclear factor κB,NF-κB)phosphoryla-ted(p)-p65、inhibitor κBα(IκBα)和p-IκBα的蛋白表达。结果1~50μmol·L-1豆蔻明对RAW264.7细胞没有毒性,但可以剂量依赖性抑制LPS诱导的NO分泌和iNOS、COX-2、MCP-1、TNF-α、IL-1β及IL-6的mRNA表达,25μmol·L-1豆蔻明可下调LPS诱导的iNOS、