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目的 探讨晚期糖基化终末产物(AGEs)对H9C2心肌细胞自噬的影响.方法 用AGEs(100~400 μg/mL)孵育H9C2心肌细胞24h;应用MTT法检测心肌细胞活力,荧光显微镜观察GFP-LC3自噬小体的变化情况,Western blotting(WB)检测自噬微管相关蛋白1轻链3(LC3)、腺苷5'-单磷酸(AMP)活化蛋白激酶(AMPK)和磷酸化的AMPK(p-AMPK)的表达.并进一步运用AMPK激动剂(A-769662)和抑制剂(Compound C)预处理H9C2心肌细胞6h后,运用AGEs(400 μg/mL)孵育H9C2心肌细胞12 h,WB法检测LC3、p-AMPK、AMPK蛋白的表达.结果 高浓度AGEs孵育H9C2心肌细胞24 h后降低细胞活力,并明显抑制GFP-LC3和LC3蛋白的表达(P<0.05),AMPK激动剂(A-769662)预处理可以逆转高浓度AGEs对H9C2心肌细胞p-AMPK的抑制作用,而AMPK抑制剂(Compound C)进一步降低p-AMPK的表达.结论 高浓度AGEs抑制H9C2心肌细胞LC3表达,可能与抑制AMPK信号通路有关.

作者:何丽姗;梁梦;赖镇强

来源:热带医学杂志 2022 年 22卷 1期

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作者:
何丽姗;梁梦;赖镇强
来源:
热带医学杂志 2022 年 22卷 1期
标签:
自噬;微管相关蛋白1轻链3;AMPK;晚期糖基化终末产物;H9C2心肌细胞
目的 探讨晚期糖基化终末产物(AGEs)对H9C2心肌细胞自噬的影响.方法 用AGEs(100~400 μg/mL)孵育H9C2心肌细胞24h;应用MTT法检测心肌细胞活力,荧光显微镜观察GFP-LC3自噬小体的变化情况,Western blotting(WB)检测自噬微管相关蛋白1轻链3(LC3)、腺苷5'-单磷酸(AMP)活化蛋白激酶(AMPK)和磷酸化的AMPK(p-AMPK)的表达.并进一步运用AMPK激动剂(A-769662)和抑制剂(Compound C)预处理H9C2心肌细胞6h后,运用AGEs(400 μg/mL)孵育H9C2心肌细胞12 h,WB法检测LC3、p-AMPK、AMPK蛋白的表达.结果 高浓度AGEs孵育H9C2心肌细胞24 h后降低细胞活力,并明显抑制GFP-LC3和LC3蛋白的表达(P<0.05),AMPK激动剂(A-769662)预处理可以逆转高浓度AGEs对H9C2心肌细胞p-AMPK的抑制作用,而AMPK抑制剂(Compound C)进一步降低p-AMPK的表达.结论 高浓度AGEs抑制H9C2心肌细胞LC3表达,可能与抑制AMPK信号通路有关.