目的:构建含有鞘脂激活蛋白原神经营养序列短肽-鞘脂激活肽NP(neurotrophic peptide,NP)的真核表达载体以及NP与TAT的融合蛋白真核表达载体(TAT-NP),探讨NP在前列腺癌细胞中的作用.方法:根据NP和TAT的氨基酸序列合成其DNA序列,利用基因克隆技术构建含有TAT和NP读码框架的真核表达载体pcDNA-TAT-NP和pcDNA-NP.在前列腺癌PC3、LNCaP细胞中转染上述载体后通过RT-PCR、MTT和流式细胞术,分别检测TAT-NP、NP的mRNA的表达,NP对前列腺癌细胞的增殖情况以及对细胞周期的影响.结果:经测序鉴定,成功构建pcDNA-TAT-NP和pcDNA-NP真核表达载体.RT-PCR结果显示,TAT-NP、NP能够在前列腺癌细胞中表达.MTT结果表明,TAT-NP、NP均对前列腺癌细胞增殖具有促进作用.流式细胞结果显示,TAT-NP、NP具有促进细胞进入S和G2/M期的作用.结论:外源表达的鞘脂激活肽NP能够促进前列腺癌细胞的增殖,并能影响细胞周期各时相的变化.
作者：任凯；苑辉卿；孔峰；蔡捷；王小玲；胡晓燕；徐霞；张建业
来源：山东大学学报（医学版） 2007 年 45卷 1期
