目的 构建、表达、纯化、鉴定并标记TAT-Smad7-HA融合蛋白,验证其在体外培养的人原代瘢痕疙瘩成纤维细胞(keloid fibroblast cell,KFB)中的转导活性.方法 分别将TAT-PTD、Smad7基因和HA片段依次连接入pET32a(+)质粒构建成pTAT-Smad7-HA重组原核表达载体,IPTG诱导表达后经亲和纯化、Western blot验证、肠激酶切割、目的 片段回收和FITC标记后,将FITC-TAT-Smad7-HA融合蛋白作用于体外培养的人原代KFB以观察其转导活性.结果 成功构建了TAT-Smad7-HA融合蛋白的原核表达载体pTAT-Smad7-HA,目的 蛋白在诱导后获得了高效表达(占菌体总蛋白的25
作者：刘波；张恒术
来源：第三军医大学学报 2008 年 30卷 23期
