目的 构建人信号转导和转录激活因子3(STAT3)真核表达载体,研究STAT3基因对人胃癌细胞株MGC803的影响.方法 构建pcDNA3-STAT3真核表达质粒,经脂质体介导转染胃癌细胞株MGC803.RT-PCR和Westem blotting检测转染后STAT3、P-STAT3(Y705)、P-STAT3(S727)、Survivin和PCNA在MGC803细胞中mRNA和蛋白水平的表达,CCK-8法检测pcDNA3-STAT3对细胞MGC803的影响.结果 测序及酶切鉴定证实,真核表达质粒pcDNA3-STAT3构建成功.Western blotting和RT-PCR实验结果证实,与转染空载体组相比,转染重组质粒组STAT3、P-STAT3(Y705)、P-STAT3(S727)、Survivin和PCNA在蛋白水平和mRNA水平的表达均明显升高,差异有统计学意义(P<0.05).CCK-8实验结果显示,与转染空载体组相比,转染重组质粒组人胃癌细胞株MGC803增殖能力明显升高,差异有统计学意义(P<0.05).结论 真核表达质粒pcDNA3-STAT3可以提高STAT3基因在人胃癌细胞株MGC803中的表达,并且增强胃癌细胞的增殖能力.
作者:王晓蕾;郏雁飞;郑燕;刘华;汪运山
来源:山东大学学报(医学版) 2013 年 51卷 9期