目的 探讨天然化合物网脊衣酸(RB)对前列腺癌LNCaP细胞的周期阻滞作用及分子机制.方法 细胞经RB处理后,流式细胞术检测细胞周期的变化;溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)标记法检测细胞增殖情况;Western blotting检测p53、p21CIP1(p21)及细胞周期相关蛋白的表达;实时定量PCR检测p21的mRNA水平的变化;荧光素酶报告基因检测RB对p21启动子活性的影响;转染p53突变体质粒检测p53对p21表达的影响;基因敲除p21检测其对细胞周期的作用.结果 RB可使LNCaP细胞阻滞于G0/G1期,抑制周期相关的Cyclin D、Cyclin E、Cdk 4和p-Rb表达.同时,RB可时间依赖性地诱导LNCaP细胞中野生型p53表达、促进其入核,同时上调p21的mRNA和蛋白水平.阻断p53的活性后,可抑制RB介导的p21表达及其启动子活性.而敲除p21基因,可降低RB所介导的G0/G1期阻滞,同时G2/M期细胞数量增加.结论 RB通过激活p53,在转录水平上调靶基因p21的表达,导致前列腺癌LNCaP细胞阻滞于G0/G1期,从而抑制细胞的增殖.
作者：高逢彬；司曼飞；刘永青；牛蕾蕾；苑辉卿
来源：山东大学学报（医学版） 2013 年 51卷 12期
