目的 建立结核杆菌H37Rv的基因组文库,利用特异性结合H37Rv的适配子,筛选出H37Rv的毒力基因.方法 H37Rv经溶菌酶、蛋白酶K破菌后,提取结核杆菌基因组,用Sau3AI酶切后,连入pET28a,转入大肠杆菌BL21表达,提取蛋白,非变性蛋白电泳后,转入PVDF膜,用生物素标记的适配子与蛋白杂交,SABC试剂显色,将能与适配子反应的克隆子测序,与结核杆菌基因组序列比对,找出可疑的毒力基因.结果 建立了含有711个克隆子的H37Rv基因组表达文库,通过比较分析,找出两个可疑基因:aroF与PPK.结论 本研究利用适配子筛选出了2个结核杆菌H37Rv的毒力基因,建立了一种从结核杆菌基因组文库中筛选H37Rv毒力基因的方法.
作者：周菁；陈军；任易；陈丽峰
来源：山东医药 2013 年 53卷 38期
