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目的 观察外源性转化生长因子β1(TGF-β1)对原代急性早幼粒细胞白血病细胞(APL)凋亡的影响,并探讨其可能机制.方法 将APL细胞分为4组,对照组不加任何药物,实验组用终浓度为1、5、10 ng/mL TGF-β1处理(实验1、2、3组),分别处理24、48、72 h,采用瑞氏—吉姆萨染色法检测细胞凋亡,流式细胞仪检测细胞周期,免疫组化法检测TGF-β1、P27Kip1、Cyclin E、bcl-2蛋白,RT-PCR技术检测TGF-β1、P27Kip1、Cyclin E、bcl-2 mRNA.结果 与对照组比较,实验1、2、3组24、48 h细胞凋亡率升高(P均<0.05);与同组24 h比较,实验1、2、3组48 h细胞凋亡率升高(P均<0.05).对照组细胞培养48 h未见明显细胞周期阻滞;与对照组比较,实验1组48 h细胞周期阻滞于G1期,实验2、3组APL细胞周期明显阻滞于G1期.与对照组比较,实验2组TGF-β1、P27Kip1蛋白水平升高,Cyclin E、bcl-2蛋白降低(P均<0.05).1'、2'β-actin条带亮度相同,实验2组(2道)P27Kip1 mRNA条带亮度与对照组(1道)相同,P27 Kip1 mRNA水平较对照组变化不明显;1'、2'β-actin条带亮度相同,实验2组(2道)条带亮度明显高于对照组(1道);实验2组Cyclin E条带与对照组比较亮度减低,Cyclin E表达下调.结论 外源性TGF-β1通过上调TGF-β1、P27 Kip1及下调Cyclin E、bcl-2作用,诱导细胞

作者:王蕾;李艳

来源:山东医药 2014 年 54卷 11期

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王蕾;李艳
来源:
山东医药 2014 年 54卷 11期
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转化生长因子β1 细胞凋亡 细胞周期 P27Kip1蛋白 Cyclin E蛋白 bcl-2蛋白 transforming growth factor-β1 apoptosis cell cycle P27Kip1 protein Cyclin E protein bcl-2 protein
目的 观察外源性转化生长因子β1(TGF-β1)对原代急性早幼粒细胞白血病细胞(APL)凋亡的影响,并探讨其可能机制.方法 将APL细胞分为4组,对照组不加任何药物,实验组用终浓度为1、5、10 ng/mL TGF-β1处理(实验1、2、3组),分别处理24、48、72 h,采用瑞氏—吉姆萨染色法检测细胞凋亡,流式细胞仪检测细胞周期,免疫组化法检测TGF-β1、P27Kip1、Cyclin E、bcl-2蛋白,RT-PCR技术检测TGF-β1、P27Kip1、Cyclin E、bcl-2 mRNA.结果 与对照组比较,实验1、2、3组24、48 h细胞凋亡率升高(P均<0.05);与同组24 h比较,实验1、2、3组48 h细胞凋亡率升高(P均<0.05).对照组细胞培养48 h未见明显细胞周期阻滞;与对照组比较,实验1组48 h细胞周期阻滞于G1期,实验2、3组APL细胞周期明显阻滞于G1期.与对照组比较,实验2组TGF-β1、P27Kip1蛋白水平升高,Cyclin E、bcl-2蛋白降低(P均<0.05).1'、2'β-actin条带亮度相同,实验2组(2道)P27Kip1 mRNA条带亮度与对照组(1道)相同,P27 Kip1 mRNA水平较对照组变化不明显;1'、2'β-actin条带亮度相同,实验2组(2道)条带亮度明显高于对照组(1道);实验2组Cyclin E条带与对照组比较亮度减低,Cyclin E表达下调.结论 外源性TGF-β1通过上调TGF-β1、P27 Kip1及下调Cyclin E、bcl-2作用,诱导细胞