目的:观察胎鼠胰腺干细胞体外对胰岛功能的保护作用。方法将孕16 d的SD大鼠胎鼠胰腺干细胞分离、纯化、培养传代,免疫细胞化学法及流式细胞术鉴定;分离纯化SD大鼠胰岛,双硫腙鉴定后分为A组和B组,分别行单纯胰岛培养及胰岛与胰腺干细胞联合培养14 d,期间观察胰岛形态变化、检测胰岛存活率及细胞凋亡率, ELISA法检测胰岛素分泌量、计算刺激指数。取两组培养7 d后悬浮生长的胰岛移植入糖尿病大鼠左肾包膜下,术后每天尾静脉采血以快速血糖测试仪检测血糖。结果胎鼠胰腺干细胞培养传代3代后免疫细胞化学可见巢蛋白(Nestin)阳性细胞,流式细胞术测定其含量占74.1%;培养第7、14天时B组胰岛存活率显著高于A组(P均<0.01),培养第7天时B组胰岛细胞凋亡率显著低于A组(P<0.05);培养第7、14天时B组高糖刺激后胰岛素分泌量及刺激指数均显著高于A组(P均<0.01);B组移植后大鼠血糖第5天降至正常。结论胎鼠胰腺干细胞与胰岛联合培养可明显延长胰岛体外存活时间并使其保持良好的活性。
作者:张育森;常彩红;张悦;李富荣;鲍世韵
来源:山东医药 2014 年 15期