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目的:观察下调肾癌786-O细胞中叉头框转录因子M1(FoxM1)基因的表达对肾癌细胞生物学行为的影响。方法采用FoxM1的干扰序列和短发夹RNA( shRNA)构建shFoxM1质粒。将786-O细胞分为shFoxM1组与对照组,分别转染shFoxM1、scramble质粒48 h。分别用Real-time PCR、Western blot法检测细胞FoxM1 mRNA及蛋白,平板克隆形成实验观察1周细胞克隆形成率,采用流式细胞仪检测细胞周期及细胞凋亡率,Transwell实验观察细胞迁移和侵袭能力,MTT法检测细胞培养0、24、48、72 h时的细胞吸光度值。结果与对照组比较,shFoxM1组FoxM1 mRNA和蛋白表达减少,细胞克隆形成率、细胞吸光度值降底,G1期细胞比例增加而G2、S期减少,早期凋亡率增加,迁移、侵袭的穿膜细胞减少,P均<0.05。结论下调FoxM1基因表达,可抑制肾癌786-O细胞的增殖、迁移、侵袭能力,使细胞阻滞于G1期,促进细胞的早期凋亡。

作者:程鑫宇;吴小荣;贾博深;沙建军;陈勇辉;黄吉炜;张进;刘东明;黄翼然

来源:山东医药 2015 年 30期

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作者:
程鑫宇;吴小荣;贾博深;沙建军;陈勇辉;黄吉炜;张进;刘东明;黄翼然
来源:
山东医药 2015 年 30期
标签:
叉头框转录因子M1 肾肿瘤 透明细胞癌 细胞增殖 细胞凋亡 核糖核酸干扰技术 forkhead box protein M 1 kidney neoplasms clear cell carcinoma cell proliferation apoptosis RNA in-terference technology
目的:观察下调肾癌786-O细胞中叉头框转录因子M1(FoxM1)基因的表达对肾癌细胞生物学行为的影响。方法采用FoxM1的干扰序列和短发夹RNA( shRNA)构建shFoxM1质粒。将786-O细胞分为shFoxM1组与对照组,分别转染shFoxM1、scramble质粒48 h。分别用Real-time PCR、Western blot法检测细胞FoxM1 mRNA及蛋白,平板克隆形成实验观察1周细胞克隆形成率,采用流式细胞仪检测细胞周期及细胞凋亡率,Transwell实验观察细胞迁移和侵袭能力,MTT法检测细胞培养0、24、48、72 h时的细胞吸光度值。结果与对照组比较,shFoxM1组FoxM1 mRNA和蛋白表达减少,细胞克隆形成率、细胞吸光度值降底,G1期细胞比例增加而G2、S期减少,早期凋亡率增加,迁移、侵袭的穿膜细胞减少,P均<0.05。结论下调FoxM1基因表达,可抑制肾癌786-O细胞的增殖、迁移、侵袭能力,使细胞阻滞于G1期,促进细胞的早期凋亡。