目的 探讨溶血磷脂酸(LPA)对乳腺癌MDA-MB-231细胞迁移和侵袭能力影响的机制.方法 ①将体外培养的MDA-MB-231细胞分为转染组、对照序列组和空白组.转染组转染(YAP)siRNA 3 h后加入浓度50 μmol/L的LPA继续培养16 h.对照序列组转染对照序列 3 h后加入浓度50 μmol/L的LPA继续培养16 h.空白组不转染、不加LPA,常规培养16 h.用Transwell小室行细胞迁移实验和细胞侵袭实验观察各组细胞迁移、侵袭能力.②用50 μmol/L的LPA培养MDA-MB-231细胞0、10、30、60、120、240、480 min,收集细胞,用Western blotting法检测磷酸化YAP(p-YAP)相对表达量.用0、1、10、20、50 μmol/L的LPA培养MDA-MB-231细胞120 min,收集细胞,用Western blotting法检测磷酸化YAP相对表达量.③将体外培养的MDA-MB-231细胞分为1、2、3、4、5、6、7组,分别加入培养基、MAPK通路阻断剂SB203580、PI3K通路阻断剂LY294002、Akt通路阻断剂MK2206、 MEK通路阻断剂PD98059、Rho抑制剂(C3转移酶)和ROCK抑制剂(Y27632),然后加入50 μmol/L的LPA继续培养120 min.采Western blotting法检测pYAP表达.结果 ①转染组、对照序列组、空白组细胞迁移实验穿膜细胞数分别为(10.01±2.05)、(12.13±2.44)、(7.06±2.54)个,细胞侵袭实验穿膜细胞数分别为(9.24±2.1

作者：范志刚；蔡惠；李万军；肖栋；梁明；王丽；王永恒；王健生

来源：山东医药 2017 年 57卷 23期