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目的 探讨E1A基因对三阴乳腺癌(TNBC)细胞侵袭迁移的影响及机制.方法 采用脂质体转染法将E1A真核表达载体(pcDNA3.0-E1A)(E1A稳转克隆组)、pcDNA3.0空载质粒(空载克隆组)转染至TNBC MDA-MB-231细胞中,G418筛选得到E1A稳定过量表达的细胞克隆,以未转染质粒的MDA-MB-231细胞为空白对照组.采用Western blotting法对稳转克隆进行鉴定.细胞划痕试验检测各组细胞的迁移能力,Transwell小室试验检测各组细胞的侵袭能力,Western blotting法检测各组细胞中HSPA5蛋白表达水平.结果 G418筛选建立稳定转染pcDNA3.0-E1A质粒的MDA-MB-231细胞克隆(E1A稳转克隆).与空白对照组和空载克隆组相比,E1A稳转克隆组的细胞迁移和侵袭能力均降低(P均<0.05),细胞HSPA5蛋白表达水平下降(P均<0.05).结论 E1A基因能够明显抑制TNBC细胞的侵袭迁移,其机制可能与EA1促进HSPA5蛋白降解有关.

作者:邰亦成;方琦;谈珂岚;黄贵;张凌焱

来源:山东医药 2017 年 57卷 29期

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作者:
邰亦成;方琦;谈珂岚;黄贵;张凌焱
来源:
山东医药 2017 年 57卷 29期
标签:
三阴乳腺癌 E1A 细胞侵袭 细胞迁移 triple-negative breast cancer E1A cell invasion cell migration
目的 探讨E1A基因对三阴乳腺癌(TNBC)细胞侵袭迁移的影响及机制.方法 采用脂质体转染法将E1A真核表达载体(pcDNA3.0-E1A)(E1A稳转克隆组)、pcDNA3.0空载质粒(空载克隆组)转染至TNBC MDA-MB-231细胞中,G418筛选得到E1A稳定过量表达的细胞克隆,以未转染质粒的MDA-MB-231细胞为空白对照组.采用Western blotting法对稳转克隆进行鉴定.细胞划痕试验检测各组细胞的迁移能力,Transwell小室试验检测各组细胞的侵袭能力,Western blotting法检测各组细胞中HSPA5蛋白表达水平.结果 G418筛选建立稳定转染pcDNA3.0-E1A质粒的MDA-MB-231细胞克隆(E1A稳转克隆).与空白对照组和空载克隆组相比,E1A稳转克隆组的细胞迁移和侵袭能力均降低(P均<0.05),细胞HSPA5蛋白表达水平下降(P均<0.05).结论 E1A基因能够明显抑制TNBC细胞的侵袭迁移,其机制可能与EA1促进HSPA5蛋白降解有关.