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目的 研究Twist基因沉默对人三阴性乳腺癌细胞Hs578T迁移和侵袭的影响及其潜在机制.方法 构建靶向Twist基因的慢病毒载体(shTwist)及其阴性对照病毒(shNC),转染人三阴性乳腺癌细胞Hs578T,建立Twist基因沉默的稳定细胞系;实验设对照组(blank)、阴性对照组(shNC)以及Twist基因沉默组(shTwist);经嘌呤霉素筛选后,倒置荧光显微镜观察各组细胞的荧光表达和感染效率,用RT-qPCR和Western blot检测Twist mRNA和蛋白的表达水平;Transwell迁移和侵袭实验分别检测细胞的迁移和侵袭能力;Western blot进一步检测Twist下游p-AKT、AKT、p-ERK1/2和ERK1/2蛋白水平.结果 成功构建Twist基因稳定沉默人三阴性乳腺癌细胞系Hs578T;与blank组和shNC组细胞相比,shTwist组细胞迁移和侵袭能力明显减弱(P<0.05,P<0.05);Twist下游p-AKT和p-ERK1/2蛋白水平显著下调(P<0.05,P<0.05).结论 在人三阴性乳腺癌细胞Hs578T中,Twist可能通过AKT和ERK信号通路促进细胞迁移和侵袭.

作者:张达容;王维莲;吴立翔;柳满然

来源:基础医学与临床 2018 年 38卷 6期

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作者:
张达容;王维莲;吴立翔;柳满然
来源:
基础医学与临床 2018 年 38卷 6期
标签:
Twist 乳腺癌 细胞迁移 细胞侵袭 Twist breast cancer cell migration cell invasion
目的 研究Twist基因沉默对人三阴性乳腺癌细胞Hs578T迁移和侵袭的影响及其潜在机制.方法 构建靶向Twist基因的慢病毒载体(shTwist)及其阴性对照病毒(shNC),转染人三阴性乳腺癌细胞Hs578T,建立Twist基因沉默的稳定细胞系;实验设对照组(blank)、阴性对照组(shNC)以及Twist基因沉默组(shTwist);经嘌呤霉素筛选后,倒置荧光显微镜观察各组细胞的荧光表达和感染效率,用RT-qPCR和Western blot检测Twist mRNA和蛋白的表达水平;Transwell迁移和侵袭实验分别检测细胞的迁移和侵袭能力;Western blot进一步检测Twist下游p-AKT、AKT、p-ERK1/2和ERK1/2蛋白水平.结果 成功构建Twist基因稳定沉默人三阴性乳腺癌细胞系Hs578T;与blank组和shNC组细胞相比,shTwist组细胞迁移和侵袭能力明显减弱(P<0.05,P<0.05);Twist下游p-AKT和p-ERK1/2蛋白水平显著下调(P<0.05,P<0.05).结论 在人三阴性乳腺癌细胞Hs578T中,Twist可能通过AKT和ERK信号通路促进细胞迁移和侵袭.