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目的 观察沉默INK4基因座中反义非编码RNA(ANRILA)对人宫颈癌细胞株HeLa增殖的影响,并探讨其机制.方法 取对数生长期HeLa细胞分为观察组和对照组,分别ANRIL-siRNA、对照siRNA乱序.转染24、48 h时采用CCK-8法观察两组细胞增殖情况(结果 以OD 450表示).转染48 h时采用荧光定量PCR法检测两组细胞ANRIL、p21、周期蛋白依赖性激酶6(CDK6)、周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)mRNA相对表达量,采用CHIP实验观察两组细胞p21基因H3K27位点三甲基化状态.结果 转染24 h观察组、对照组OD 450分别为0.55±0.08、0.84±0.11,转染72 h观察组、对照组OD 450分别为1.21±0.12、1.82±0.14.转染24、72 h观察组OD 450均低于对照组(P<0.05).转染48 h观察组ANRIL及CDK6、CDK2 mRNA相对表达量低于对照组(P均<0.05),p21 mRNA相对表达量高于对照组(P均<0.05).转染48 h两组细胞p21基因H3K27位点三甲基化水平观察组、对照组分别为1.19±0.08、5.62±0.21,观察组低于对照组(P<0.05).结论 沉默ANRIL可抑制宫颈癌HeLa细胞的增殖.其机制是沉默ANRIL可以降低宫颈癌HeLa细胞p21基因H3K27位点三甲基化水平,促进p21mRNA表达,抑制CDK6、CDK2 mRNA表达,从而抑制宫颈癌HeLa细胞增殖.

作者:梅奇华;杨鸿雁;时黔宇;李琼;王卓;赵鸿

来源:山东医药 2017 年 57卷 35期

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作者:
梅奇华;杨鸿雁;时黔宇;李琼;王卓;赵鸿
来源:
山东医药 2017 年 57卷 35期
标签:
宫颈肿瘤 宫颈癌 长链非编码RNA INK4基因座中反义非编码RNA 细胞增殖 p21基因 周期蛋白依赖性激酶 甲基化 cervical neoplasms cervical carcinoma long non-coding RNA noncoding RNA in antisense of INK4 lo-ci p21 gene cyclin-dependent kinase methylation
目的 观察沉默INK4基因座中反义非编码RNA(ANRILA)对人宫颈癌细胞株HeLa增殖的影响,并探讨其机制.方法 取对数生长期HeLa细胞分为观察组和对照组,分别ANRIL-siRNA、对照siRNA乱序.转染24、48 h时采用CCK-8法观察两组细胞增殖情况(结果 以OD 450表示).转染48 h时采用荧光定量PCR法检测两组细胞ANRIL、p21、周期蛋白依赖性激酶6(CDK6)、周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)mRNA相对表达量,采用CHIP实验观察两组细胞p21基因H3K27位点三甲基化状态.结果 转染24 h观察组、对照组OD 450分别为0.55±0.08、0.84±0.11,转染72 h观察组、对照组OD 450分别为1.21±0.12、1.82±0.14.转染24、72 h观察组OD 450均低于对照组(P<0.05).转染48 h观察组ANRIL及CDK6、CDK2 mRNA相对表达量低于对照组(P均<0.05),p21 mRNA相对表达量高于对照组(P均<0.05).转染48 h两组细胞p21基因H3K27位点三甲基化水平观察组、对照组分别为1.19±0.08、5.62±0.21,观察组低于对照组(P<0.05).结论 沉默ANRIL可抑制宫颈癌HeLa细胞的增殖.其机制是沉默ANRIL可以降低宫颈癌HeLa细胞p21基因H3K27位点三甲基化水平,促进p21mRNA表达,抑制CDK6、CDK2 mRNA表达,从而抑制宫颈癌HeLa细胞增殖.