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目的 探讨红霉素对烟草烟雾刺激下人巨噬细胞TNF-α释放的抑制作用及其机制.方法 应用佛波酯(PMA)诱导人单核细胞系U937(以下称U937细胞)为巨噬细胞,用0.1%、1%、2.5%的烟草烟雾提取物(CSE)和0.1、1、10 μg/mL的红霉素分别作用于巨噬细胞24、48、72 h,筛选对巨噬细胞增殖活性影响最小的红霉素、CSE作用浓度和作用时间.经筛选,选用1 μg/mL红霉素溶液和1% CSE溶液、作用时间24 h进行后续实验.将U937细胞诱导分化为巨噬细胞,随机将细胞分为空白对照组、CSE组、CSE+红霉素组、TSA组.空白对照组不予处理;CSE组加入1%CSE溶液孵育24 h;红霉素+ CSE组先加入1 μg/mL红霉素溶液预孵育24 h,再加入1%CSE溶液孵育24 h;TSA组加入100 ng/mL TSA孵育24 h.收集各组培养液上清,采用ELISA法检测培养液上清TNF-α含量,采用Western blotting法检测各组HDAC1、NF-κB蛋白表达.结果 空白对照组培养液上清TNF-α含量为(274.96±182.39) pg/mL,CSE组为(744.46±638.38) pg/mL,红霉素+ CSE组为(646.57±603.53) pg/mL(P均<0.05).与空白对照组比较,CSE组、红霉素+ CSE组、TSA组HDAC1蛋白表达降低、NF-κB蛋白表达升高(P均<0.05);与CSE组比较,红霉素+ CSE组HDAC1蛋白表达升高,NF-κB蛋白表达降低(P均<0.05);与红霉素+ CSE组

作者:邱居烽;李梅华;钟小宁;文明智;马南;唐晓娟;黄梅;梁权

来源:山东医药 2018 年 58卷 8期

知识库介绍

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作者:
邱居烽;李梅华;钟小宁;文明智;马南;唐晓娟;黄梅;梁权
来源:
山东医药 2018 年 58卷 8期
标签:
慢性阻塞性肺疾病 红霉素 烟草烟雾暴露 炎症反应 肿瘤坏死因子α 组蛋白去乙酰化酶1 chronic obstructive pulmonary disease erythromycin cigarette smoke exposure inflammatory response tumor necrosis factor-α histone deacetylase 1
目的 探讨红霉素对烟草烟雾刺激下人巨噬细胞TNF-α释放的抑制作用及其机制.方法 应用佛波酯(PMA)诱导人单核细胞系U937(以下称U937细胞)为巨噬细胞,用0.1%、1%、2.5%的烟草烟雾提取物(CSE)和0.1、1、10 μg/mL的红霉素分别作用于巨噬细胞24、48、72 h,筛选对巨噬细胞增殖活性影响最小的红霉素、CSE作用浓度和作用时间.经筛选,选用1 μg/mL红霉素溶液和1% CSE溶液、作用时间24 h进行后续实验.将U937细胞诱导分化为巨噬细胞,随机将细胞分为空白对照组、CSE组、CSE+红霉素组、TSA组.空白对照组不予处理;CSE组加入1%CSE溶液孵育24 h;红霉素+ CSE组先加入1 μg/mL红霉素溶液预孵育24 h,再加入1%CSE溶液孵育24 h;TSA组加入100 ng/mL TSA孵育24 h.收集各组培养液上清,采用ELISA法检测培养液上清TNF-α含量,采用Western blotting法检测各组HDAC1、NF-κB蛋白表达.结果 空白对照组培养液上清TNF-α含量为(274.96±182.39) pg/mL,CSE组为(744.46±638.38) pg/mL,红霉素+ CSE组为(646.57±603.53) pg/mL(P均<0.05).与空白对照组比较,CSE组、红霉素+ CSE组、TSA组HDAC1蛋白表达降低、NF-κB蛋白表达升高(P均<0.05);与CSE组比较,红霉素+ CSE组HDAC1蛋白表达升高,NF-κB蛋白表达降低(P均<0.05);与红霉素+ CSE组