目的 观察微小RNA-26b(miR-26b)对不同分化状态神经干细胞(NSCs)系C17.2向肝细胞生长因子(HGF)趋化迁移的影响.方法 ①HGF刺激下不同分化状态NSCs细胞miR-26b检测取C17.2细胞,置于含N2和F12的诱导分化培养基中诱导分化.将细胞分为A、B、C、D组,A、B、C组分别于诱导分化12、24、72 h三个时间点终止诱导分化,D组为诱导分化前的细胞.采用实时荧光定量PCR法检测各组细胞miR-26b.将诱导分化培养基更换为含25 ng/mL的HGF完全培养基,孵育5 h,每组均设相应对照,予无HGF的完全培养基孵育5 h.检测各组细胞miR-26b.②抑制、过表达miR-26b对C17.2细胞向HGF的趋化迁移的影响取对数生长期C17.2细胞,分为两组,分别转染miR-26b mimic(促进miR-26b表达)、miR-26b NC(对照),将完全生长培养基更换为含N2和F12的诱导分化培养基,分别于诱导分化0、12、24、72 h时终止诱导分化,采用Transwell实验测算各分化时间细胞的迁移细胞率.取对数生长期C17.2细胞,分为两组,分别转染miR-26b inhibitor(抑制miR-26b表达)、miR-26b乱序对照(ConⅠ),将完全生长培养基更换为含N2和F12的诱导分化培养基,分别于诱导分化0、12、24、72 h时终止诱导分化,采用Transwell实验测算各分化时间细胞的迁移细胞率.结果 A、B、C、D组细胞miR-26b相对表达量分
作者:熊英;汪显耀;秦臻;田羽;王岚;潘际刚;许键炜
来源:山东医药 2018 年 58卷 43期