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目的 探讨miR-195过表达对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞增殖的影响及作用机制.方法 将培养好的SCC-4细胞随机分组,设计合成miR-195 mimic,并将对照试剂、miR-195 mimic试剂分别转染至对照组、miR-195mimic组.用细胞活力测定(MTS)实验检测miR-195过表达对细胞增殖的影响;用生物信息软件及荧光素酶报告基因实验检测miR-195对成纤维细胞生长因子7(FGF7)基因的靶向调控作用;qRT-PCR检测miR-195过表达对细胞内FGF7 mRNA表达的影响.构建FGF7过表达质粒,将FGF7过表达对照vector+ miR-195 mimic试剂、FGF7过表达+ miR-195 mimic试剂分别转染至miR-195 mimic+ vector组、miR-195 mimic+ FGF7组,MTS实验检测FGF7对miR-195 mimic SCC-4细胞增殖的影响,Western blotting实验检测细胞内磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶(pPI3K)、磷酸化蛋白激酶B (pAKT)蛋白的表达.结果 细胞贴壁第3、4天miR-195 mimic组细胞增殖能力较对照组低(P均<0.05).生物信息软件预测和荧光素酶报告基因实验证实,FGF7为miR-195的靶基因.细胞贴壁第2、3、4天miR-195mimic+ FGF7组细胞增殖能力较miR-195 mimic+ vector组高(P均<0.05).miR-195 mimic组pI3K、pAKT蛋白相对表达量低于对照组(P均<0.05),miR-195 mimic+ FGF7组pI3K、pAKT蛋白相对表达量高于miR-19

作者:苏春艳;阮艳;彭诚

来源:山东医药 2019 年 59卷 25期

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作者:
苏春艳;阮艳;彭诚
来源:
山东医药 2019 年 59卷 25期
标签:
口腔鳞状细胞癌 微小RNA-195 成纤维细胞生长因子7 PI3 K/AKT信号通路 细胞增殖
目的 探讨miR-195过表达对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞增殖的影响及作用机制.方法 将培养好的SCC-4细胞随机分组,设计合成miR-195 mimic,并将对照试剂、miR-195 mimic试剂分别转染至对照组、miR-195mimic组.用细胞活力测定(MTS)实验检测miR-195过表达对细胞增殖的影响;用生物信息软件及荧光素酶报告基因实验检测miR-195对成纤维细胞生长因子7(FGF7)基因的靶向调控作用;qRT-PCR检测miR-195过表达对细胞内FGF7 mRNA表达的影响.构建FGF7过表达质粒,将FGF7过表达对照vector+ miR-195 mimic试剂、FGF7过表达+ miR-195 mimic试剂分别转染至miR-195 mimic+ vector组、miR-195 mimic+ FGF7组,MTS实验检测FGF7对miR-195 mimic SCC-4细胞增殖的影响,Western blotting实验检测细胞内磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶(pPI3K)、磷酸化蛋白激酶B (pAKT)蛋白的表达.结果 细胞贴壁第3、4天miR-195 mimic组细胞增殖能力较对照组低(P均<0.05).生物信息软件预测和荧光素酶报告基因实验证实,FGF7为miR-195的靶基因.细胞贴壁第2、3、4天miR-195mimic+ FGF7组细胞增殖能力较miR-195 mimic+ vector组高(P均<0.05).miR-195 mimic组pI3K、pAKT蛋白相对表达量低于对照组(P均<0.05),miR-195 mimic+ FGF7组pI3K、pAKT蛋白相对表达量高于miR-19