目的 分析microRNA-181a-5p(miR-181a-5p)靶向调控胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白(IGF2BP2)的关系,以及对胎盘滋养层细胞HTR-8/SVneo浸润、迁移能力的影响和机制.方法 采用Targetscan7.1预测软件及双荧光素酶报道基因试验,预测并验证miR-181a-5p对IGF2BP2基因的靶向调控作用.收集子痫前期(PE)和正常妊娠妇女胎盘组织各30例,以qRT-PCR法检测miR-181a-5p和IGF2BP2 mRNA,并分析二者表达的关系.将HTR-8/SVneo细胞分为NC组、miR-181a-5p过表达组和miR-181a-5p+IGF2BP2过表达组,用Lip2000分别转染无关序列、miR-181a-5p mimic、miR-181a-5p mimic+IGF2BP2过表达质粒12 h;qRT-PCR法检测细胞中的IGF2BP2 mRNA,Boyden实验观察细胞浸润能力,Transwell实验观察细胞迁移能力,Western blotting法检测细胞中的Wnt1和β-catenin蛋白.结果 Targetscan7.1预测软件显示,miR-181a-5p与IGF2BP2 mRNA的3'UTR之间具有潜在的碱基互补结合位点;双荧光素酶报道基因试验显示,miR-181a-5p能降低野生型IGF2BP2 mRNA 3'UTR荧光素酶报告基因活性(P<0.05).与正常妊娠妇女胎盘组织比较,PE胎盘组织中miR-181a-5p表达下降、IGF2BP2表达增加(P均<0.05),且两者表达呈负相关(r=-0.601,P<0.05).与NC组比较,miR-181a-5p过表达组和miR-181a-5p+IG
作者:万淑梅;彭萍;高妍
来源:山东医药 2020 年 60卷 2期