目的 探讨下调微小RNA-32-5p(miR-32-5p)表达对顺铂(DDP)耐药肺癌细胞化疗敏感性的影响及其机制.方法 体外培养人肺癌细胞系A549、SPC-A-1、H226(以下分别称A549、SPC-A-1、H226细胞)和人正常肺支气管上皮细胞系BEAS2B(以下称BEAS2B细胞),采用RT-qPCR法检测miR-32-5p表达,选择miR-32-5p相对表达量最高的肺癌细胞进行后续实验.采用药物持续接触、浓度递增诱导法筛选DDP耐药肺癌细胞.采用MTS法检测肺癌细胞及其DDP耐药细胞DDP半数抑制浓度(IC50),采用RT-qPCR法检测肺癌细胞及其DDP耐药细胞miR-32-5p表达.选择上述DDP耐药肺癌细胞,随机分为观察组和对照组,分别转染miR-32-5p inhibitor、NC inhibitor,采用RT-qPCR法验证转染效率,采用MTS法检测两组DDP IC50,采用流式细胞仪检测两组细胞凋亡率,采用Westernblotting法检测两组Bax、Bcl-2蛋白表达.通过TargetScan7.2软件预测miR-32-5p的靶基因.取DDP耐药肺癌细胞,随机分为miR-32-5p mimic-TCF21-wt组、miR-32-5p inhibitor-TCF21-wt组、miR-32-5p mimic-TCF21-mut组、miR-32-5p inhibitor-TCF21-mut组,相应转染miR-32-5p mimic或miR-32-5p inhibitor、pGLO-TCF21-wt或pGLO-TCF21-mut,采用双荧光素酶报告基因实验检测各组荧光素酶活性.结果 A549、SPC-A-1、H226
作者:史明;陈兴;李丁
来源:山东医药 2020 年 60卷 7期