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目的 探讨TFAP4低表达对胃癌细胞恶性生物学行为的影响及机制.方法 用RT-PCR、Western blot-ting法检测细胞中TFAP4表达,选取TFAP4 mRNA和蛋白表达最高的MGC-803细胞作为实验细胞.将MGC-803细胞随机分为空白对照组(Control组)、阴性对照组(NC组)、TFAP沉默组(siTFAP组)、TFAP沉默+空载转染组(siT-FAP4+Vector组)、TFAP沉默+HMGB1过表达组(siTFAP4+HMGB1组)并进行转染.用RT-PCR技术检测各组细胞中TFAP4 mRNA表达,确认转染效率.用RT-PCR技术检测细胞中HMGB1 mRNA表达,用Western blotting法检测细胞中TFAP4、HMGB1蛋白表达及胞质、胞核YAP蛋白表达,用划痕实验检测细胞迁移能力,用Transwell小室实验检测细胞侵袭能力,用体外血管生成实验检测内皮细胞成管能力,用双荧光素酶报告基因实验验证TFAP4对HMGB1的转录调控作用.结果 与NC组比较,siTFAP4组细胞迁移率低,细胞侵袭数目和管腔形成数目少,TFAP4、HMGB1及胞核YAP表达低,胞质YAP表达高(P均<0.05).与siTFAP4+Vector组比较,siTFAP4+HMGB1组细胞迁移率高,细胞侵袭数目和管腔形成数目多,HMGB1、胞核YAP表达高,胞质YAP表达低(P均<0.05).双荧光素酶实验结果显示,与pGL3-Basic+TFAP4+pRL-TK Vector转染细胞比较,pGL3-Basic-Promoter+TFAP4+pRL-TK Vector转染细胞荧光

作者:吴琦;王洪伟;郭素芬;于建渤;王红艳;于微;于泽宇;郑慧哲

来源:山东医药 2021 年 61卷 28期

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作者:
吴琦;王洪伟;郭素芬;于建渤;王红艳;于微;于泽宇;郑慧哲
来源:
山东医药 2021 年 61卷 28期
标签:
胃癌;转录因子激活增强子结合蛋白4;细胞侵袭;细胞迁移;血管生成;高迁移率族蛋白B1
目的 探讨TFAP4低表达对胃癌细胞恶性生物学行为的影响及机制.方法 用RT-PCR、Western blot-ting法检测细胞中TFAP4表达,选取TFAP4 mRNA和蛋白表达最高的MGC-803细胞作为实验细胞.将MGC-803细胞随机分为空白对照组(Control组)、阴性对照组(NC组)、TFAP沉默组(siTFAP组)、TFAP沉默+空载转染组(siT-FAP4+Vector组)、TFAP沉默+HMGB1过表达组(siTFAP4+HMGB1组)并进行转染.用RT-PCR技术检测各组细胞中TFAP4 mRNA表达,确认转染效率.用RT-PCR技术检测细胞中HMGB1 mRNA表达,用Western blotting法检测细胞中TFAP4、HMGB1蛋白表达及胞质、胞核YAP蛋白表达,用划痕实验检测细胞迁移能力,用Transwell小室实验检测细胞侵袭能力,用体外血管生成实验检测内皮细胞成管能力,用双荧光素酶报告基因实验验证TFAP4对HMGB1的转录调控作用.结果 与NC组比较,siTFAP4组细胞迁移率低,细胞侵袭数目和管腔形成数目少,TFAP4、HMGB1及胞核YAP表达低,胞质YAP表达高(P均<0.05).与siTFAP4+Vector组比较,siTFAP4+HMGB1组细胞迁移率高,细胞侵袭数目和管腔形成数目多,HMGB1、胞核YAP表达高,胞质YAP表达低(P均<0.05).双荧光素酶实验结果显示,与pGL3-Basic+TFAP4+pRL-TK Vector转染细胞比较,pGL3-Basic-Promoter+TFAP4+pRL-TK Vector转染细胞荧光