目的 探讨转录因子环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)在蛋白激酶A(PKA)信号防止足细胞损伤中的作用.方法 使用条件永恒的小鼠足细胞株(5P12) 14 ～25代分化的足细胞进行研究,细胞分为对照组、阿霉素(ADR)处理组(ADR组)和PKA特异性激动剂(pCPT-cAMP)预孵育+ADR刺激组(pCPT-cAMP+ADR组).CCK-8法检测细胞毒性;Western blotting检测足细胞内被切割的半胱氨酸蛋白酶-3(cleavedcaspase-3)表达;siRNA抑制细胞内CREB表达,免疫荧光共聚焦显微镜和Western blotting检测磷酸化CREB(p-CREB)的定位和表达.结果 ADR诱导足细胞内cleaved caspase-3表达升高,pCPT-cAMP预孵育可显著降低ADR诱导的cleaved caspase-3表达上升.ADR使足细胞减少为原来的(40.45±6.78)％,pCPT-cAMP预孵育使细胞数量恢复为原来的(69.8±5.48)％.Western blotting检测结果显示:pCPT-cAMP分别预孵育5、15 min可使足细胞总蛋白中p-CREB表达分别上升(105.64±38.21)％和(98.61±41.03)％,细胞核内p-CREB的表达上升(114.52±11.28)％和(118.84±14.44)％.免疫荧光共聚焦显微镜检测显示pCPT-cAMP主要引起细胞核内p-CREB表达上升.siRNA可使足细胞CREB蛋白表达下降为原来的(25.1±2.44)％,且pCPT-cAMP预孵育不能防止ADR诱导的cleaved caspase-3表达升高.结

作者：向芃；谢可炜；姜金星；倪兆慧；顾乐怡

来源：上海交通大学学报（医学版） 2016 年 36卷 1期