目的 探讨γ-氨基丁酸(GABA)通过环磷酸腺苷/蛋白激酶A(cAMP/PKA)通路抑制胆管癌细胞株QBC939生长的分子机制.方法 分别以GABA、GABA+环磷酸腺苷(cAMP)激动剂(8Br)、GABA+蛋白激酶A(PKA)拮抗剂(H89)孵育胆管癌细胞株QBC939 48 h,采用噻唑蓝(MTT)法及膜联蛋白Ⅴ-异硫氰酸荧光素/碘化丙锭(Annexin Ⅴ-FITC/PI)流式细胞术检测细胞的增殖及凋亡,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测cAMP、PKA表达,Western blot法检测蛋白激酶AⅠ(PKAⅠ)、蛋白激酶AⅡ(PKAⅡ)及细胞外调节蛋白激酶(ERK)表达.构建人胆管癌裸鼠皮下种植瘤模型,随机分为对照组和GABA治疗组,用药5周后观察肿瘤体积,Western blot法检测种植瘤PKA Ⅰ、PKAⅡ及ERK的表达.结果 MTT及流式细胞术检测结果显示8Br协同GABA所导致的增殖抑制和凋亡效应,而H89拮抗此效应;ELISA检测结果显示GABA明显上调cAMP及PKA的含量,8Br协同GABA增加cAMP含量,H89拮抗GABA所导致PKA的含量;Western blot检测结果显示,GABA较对照组能明显下调PKA Ⅰ(0.087 8±0.003 0比0.152 1±0.0030,t=29.687,P<0.05),上调PKAⅡ(0.2042±0.0120比0.146 1±0.0720,t=8.152,P<0.05)蛋白的表达,且下调ERK蛋白的表达(0.368 3±0.007 0比0.4687±0.0100,t=13.647,P<0.05);与对照组比较,治疗组的种
作者:王成;黄强;朱成林;刘臣海;谢放;黄朝君;王伟
来源:中华实验外科杂志 2016 年 33卷 6期