目的 探讨临床标本中分离的耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)的耐药机制.方法 收集2010年1月-2013年12月临床标本中分离的CRKP.采用Vitek-2 Compact全自动微生物分析系统进行鉴定并联合纸片扩散法(K-B法)进行药物敏感性试验,MicroflexTM MALDI-TOF MS进行菌种复核.改良Hodge试验筛查碳青霉烯酶表型;PCR方法检测blaKPC、blaGES、blaIMP、blaV.blaNDM.I和blaOXA.8等碳青霉烯酶基因及AmpC酶基因,并对阳性扩增产物进行基因测序;SDS-PAGE检测菌株外膜蛋白Ompk35和Ompk36的表达情况;对携带碳青霉烯酶基因的菌株进行质粒转移接合试验.结果 75株CRKP中,有71株改良Hodge试验阳性,其中69株携带blaKPC-2基因合并Ompk36变异(68株)或Ompk36缺失(1株);1株携带blaIMP.基因合并Ompk35和Ompk36变异,1株携带blaNDM-1和bla CIT-1基因合并Ompk35和Ompk36变异.4株改良Hodge试验阴性的菌株中,3株DHA-1基因阳性合并Ompk36缺失(1株)或Ompk36变异(2株),另1株未检测到耐药基因但Ompk36缺失.仅4株产碳青霉烯酶菌株(4/71)转移接合试验成功.结论 临床标本分离的CRKP对碳青霉烯类抗生素的主要耐药机制为产KPC-2酶合并外膜蛋白表达异常.需加强院内感染预防控制措施,防止此类菌株的播散.
作者：刘婧娴；俞静；李媛睿；刘瑛
来源：上海交通大学学报（医学版） 2016 年 36卷 1期
