目的 研究低糖后复糖对H9c2大鼠心肌细胞自噬活性的影响.方法 将H9c2细胞分为低糖组(LG)、复糖组(RG)、自噬抑制组[RG+氯喹(CQ)]和空白对照组(Con).LG组用低糖培养基培养2 h;RG组用低糖培养基培养2h后,用高糖培养基继续培养2 h;RG +CQ组在给予低糖和高糖处理前1h加入CQ;Con组始终用高糖培养基培养.采用MTT法检测H9c2细胞增殖能力,LDH活性检测试剂盒检测细胞毒性,Western blotting检测p-mTOR、mTOR、p-AMPK、AMPK、LC3、beclin-1的表达量.结果 与LG组相比,RG组细胞增殖能力降低,LDH活性升高(均P<0.05);与RG组相比,RG +CQ组细胞增殖能力进一步降低,LDH活性进一步升高(均P<0.05).Western blotting结果显示,与LG组相比,RG组p-AMPK、LC3Ⅱ/Ⅰ和beclin-1表达量增加,p-mTOR表达量降低(均P<0.05);RG+ CQ组较RG组LC3Ⅱ/Ⅰ和beclin-1表达进一步增加(均P<0.05).结论 H9c2细胞经低糖后复糖处理后自噬活性增强,这可能与激活AMPK/mTOR途径有关,且此时自噬活性增强对于心肌细胞具有保护作用.
作者:毕亚光;王光宇;刘向东;魏盟;张庆勇
来源:上海交通大学学报(医学版) 2016 年 36卷 10期