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目的 探讨OVA基因修饰的树突状细胞疫苗(DC-OVA)在肿瘤模拟抗原OVA(ovabumin)的裸鼠肺癌模型体内抗肺肿瘤的效应.方法 裸鼠右肺原位接种携带OVA的Lewis肺癌细胞(Lewis lung cancer cell-OVA,LLC-OVA)悬液,建立裸鼠肺癌模型.获取DC,经基因转导制备DC-OVA疫苗.Western印迹法检测OVA蛋白的表达.获取T细胞,进而制备DC疫苗系统(DC-OVA/T).CCK8试剂检测DC-OVA刺激后T细胞的增殖.模型建立2周后,尾静脉注射DC-OVA/T.Micro-CT扫描荷瘤裸鼠的胸部,观察肺部影像.H-E染色观察肺部及肿瘤组织形态结构.IHC方法观察脾、淋巴结、肿瘤组织中CD8的表达;观察肿瘤组织中SOX2、BMI1的表达.ELISA法检测血清中1L-12水平.结果 Western印迹法在样本中检测出清晰的OVA条带.DC-OVA强有效地刺激了T细胞的增殖(P<0.05).DC-OVA/T治疗4周,疫苗组裸鼠肺micro-CT未见明显肿瘤阴影;取材,裸眼可见疫苗组病灶减小,H-E染色显示疫苗组的肿瘤组织较少,肺组织形态较完整.疫苗组裸鼠的脾、淋巴结、肿瘤组织内CD8阳性表达均明显高于对照组(P<0.05,P<0.05,P<0.01),肿瘤组织中的SOX2、BMI1阳性表达明显低于对照组(P<0.05,P<0.05);血清中的IL-12含量较对照组明显升高(P <0.001).结论 基因修饰的DC疫苗在裸鼠体内具有强大的抗肺癌效应,为临床治疗

作者:周薇;陈晓;王龙;何文娟;赵培林

来源:同济大学学报(医学版) 2016 年 37卷 4期

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作者:
周薇;陈晓;王龙;何文娟;赵培林
来源:
同济大学学报(医学版) 2016 年 37卷 4期
标签:
树突状细胞疫苗 肺肿瘤 肿瘤干细胞 肿瘤免疫治疗 裸鼠 DC vaccine lung cancer tumor stem cell tumor immunotherapy nude mice
目的 探讨OVA基因修饰的树突状细胞疫苗(DC-OVA)在肿瘤模拟抗原OVA(ovabumin)的裸鼠肺癌模型体内抗肺肿瘤的效应.方法 裸鼠右肺原位接种携带OVA的Lewis肺癌细胞(Lewis lung cancer cell-OVA,LLC-OVA)悬液,建立裸鼠肺癌模型.获取DC,经基因转导制备DC-OVA疫苗.Western印迹法检测OVA蛋白的表达.获取T细胞,进而制备DC疫苗系统(DC-OVA/T).CCK8试剂检测DC-OVA刺激后T细胞的增殖.模型建立2周后,尾静脉注射DC-OVA/T.Micro-CT扫描荷瘤裸鼠的胸部,观察肺部影像.H-E染色观察肺部及肿瘤组织形态结构.IHC方法观察脾、淋巴结、肿瘤组织中CD8的表达;观察肿瘤组织中SOX2、BMI1的表达.ELISA法检测血清中1L-12水平.结果 Western印迹法在样本中检测出清晰的OVA条带.DC-OVA强有效地刺激了T细胞的增殖(P<0.05).DC-OVA/T治疗4周,疫苗组裸鼠肺micro-CT未见明显肿瘤阴影;取材,裸眼可见疫苗组病灶减小,H-E染色显示疫苗组的肿瘤组织较少,肺组织形态较完整.疫苗组裸鼠的脾、淋巴结、肿瘤组织内CD8阳性表达均明显高于对照组(P<0.05,P<0.05,P<0.01),肿瘤组织中的SOX2、BMI1阳性表达明显低于对照组(P<0.05,P<0.05);血清中的IL-12含量较对照组明显升高(P <0.001).结论 基因修饰的DC疫苗在裸鼠体内具有强大的抗肺癌效应,为临床治疗