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目的 构建可诱导表达MST1基因的慢病毒载体,为进一步研究MST1与肝癌之间的关系提供理想的模型.方法 克隆MST1基因到慢病毒载体pLVPT-tTRKRAB中,2种慢病毒载体(pLVPT-tTRKRAB-MST1和pLV-tTRKRAB-Red)与包装质粒通过293FT细胞系介导,分别包装成病毒颗粒,先后2次去感染肝癌细胞系Huh-7.培养7 d后,使用强力霉素(doxcycline)进行诱导,用Western blot检测MST1表达情况.结果 构建了可诱导MST1真核表达病毒载体并获得相应的病毒,病毒可以高效感染目的 肝癌细胞系Huh-7.在强力霉素诱导条件下,肝癌细胞系Huh-7可以表达MST1.结论 成功构建出可诱导表达MST1基因的慢病毒载体,并获得在强力霉素诱导条件下可以表达MST1的肝癌细胞亚系.

作者:顾博

来源:复旦学报(医学版) 2010 年 37卷 1期

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作者:
顾博
来源:
复旦学报(医学版) 2010 年 37卷 1期
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可诱导慢病毒载体 MST1基因 强力霉素 inducible lentiviral vector MST1 gene doxcycline
目的 构建可诱导表达MST1基因的慢病毒载体,为进一步研究MST1与肝癌之间的关系提供理想的模型.方法 克隆MST1基因到慢病毒载体pLVPT-tTRKRAB中,2种慢病毒载体(pLVPT-tTRKRAB-MST1和pLV-tTRKRAB-Red)与包装质粒通过293FT细胞系介导,分别包装成病毒颗粒,先后2次去感染肝癌细胞系Huh-7.培养7 d后,使用强力霉素(doxcycline)进行诱导,用Western blot检测MST1表达情况.结果 构建了可诱导MST1真核表达病毒载体并获得相应的病毒,病毒可以高效感染目的 肝癌细胞系Huh-7.在强力霉素诱导条件下,肝癌细胞系Huh-7可以表达MST1.结论 成功构建出可诱导表达MST1基因的慢病毒载体,并获得在强力霉素诱导条件下可以表达MST1的肝癌细胞亚系.