目的建立一种聚合酶链反应(PCR)-凝胶图像处理系统定量分析核酸扩增产物的方法。方法 1.用PCR荧光定量分析仪实时监测PCR扩增曲线，并选择合适的扩增循环次数； 2.将梯度标准乙型肝炎病毒(HBV)阳性血清(101～106拷贝/μl)分别进行40，35及32次循环次数的扩增，经琼脂糖电泳进行凝胶分析； 3.选择凝胶分析软件中能客观反映核酸实际含量的最适参数，制定标准曲线。结果 40及35次循环时，在101～104拷贝/μl线性良好，而在104，105及106拷贝/μl 3个梯度时直线上升缓慢，趋于平坦。32次循环时，10拷贝/μl未能检出，102～106拷贝/μl的5个梯度的模板(对数值)与产物(体积)有良好的线性关系(r=0.97)。结论 32次循环线性范围较广，为最适循环次数；在UVI band的吸光度定量分析指标中，以体积或体积百分比作为定量指标较好。
作者：吴晓蔓；郭海波
来源：上海医学检验杂志 2001 年 16卷 3期
