目的 建立一种定量检测血浆中髓过氧化物酶( MPO)浓度的双抗体夹心光激化学发光检测法(LiCA),用于心血管疾病的辅助诊断.方法 采用棋盘格滴定法,从针对MPO抗原的12株单克隆抗体(McAb)中筛选出最佳双抗体组合(1株McAb包被发光微粒,另l株McAb进行生物素化),进而探索2种抗体最适反应浓度及MPO LiCA的最适反应条件,评价该法的重复性、敏感性、抗干扰性及回收率,并与经典的CardioMPOTM酶联免疫吸附试验(ELISA)进行平行比较分析.结果 筛选到2株最适McAb,并与链霉亲和素包被的感光微粒连接,建立用于MPO定量测定的LiCA.该法敏感性为1.76 ng/mL,批内变异系数(CV)和天间CV分别为2.73％、3.76％,平均回收率为102.5％±8.6％,与CardioMPOTM ELISA具有良好的相关性(r=0.961,P＜0.01),正常参考范围为13.16～ 128.79 ng/mL.结论 成功建立了一种用于MPO定量检测的LiCA,该法具有高的敏感性和好的稳定性,试剂有效期长,并且操作流程简便,耗时短,在心血管疾病的辅助诊断中具有很好的应用前景.
作者：韩海荣；梁颖；赵卫国；沈茜
来源：检验医学 2012 年 27卷 4期
