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目的:比较不同培养基对大脑皮层神经干细胞增殖的影响,以寻找培养神经干细胞的有效方法.方法:体外分离生后24 h SD大鼠大脑皮层细胞,使用DMEM/F12+ B27+ bFGF、Neurobasal+ B27 bFGF和Neurobasal+B27三种培养条件,分别用悬浮培养法和贴壁培养法对细胞进行培养.免疫细胞化学技术分别以Nestin、β-TubⅣ和GFAP标记神经干细胞、神经元和星形胶质细胞.结果:在悬浮培养情况下,三种培养条件均诱导所培养的细胞形成神经球,经染色鉴定神经球中的细胞均表达Nestin;其中DMEM/F12+ B27+ bFGF培养的神经干细胞增殖速度最快(P<0.01),Neurobasal+B27培养的神经干细胞增殖效率最高(P<0.01).在贴壁培养情况下,经染色鉴定,部分细胞表达β-TubⅢ或GFAP.结论:大脑皮层神经干细胞不适合贴壁培养,DMEM/F12+ B27+ bFGF条件适合大脑皮层神经干细胞体外增殖.

作者:蔡明;陆耀飞;娄淑杰

来源:神经解剖学杂志 2013 年 29卷 1期

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作者:
蔡明;陆耀飞;娄淑杰
来源:
神经解剖学杂志 2013 年 29卷 1期
标签:
SD大鼠 大脑皮层 神经干细胞 培养方法
目的:比较不同培养基对大脑皮层神经干细胞增殖的影响,以寻找培养神经干细胞的有效方法.方法:体外分离生后24 h SD大鼠大脑皮层细胞,使用DMEM/F12+ B27+ bFGF、Neurobasal+ B27 bFGF和Neurobasal+B27三种培养条件,分别用悬浮培养法和贴壁培养法对细胞进行培养.免疫细胞化学技术分别以Nestin、β-TubⅣ和GFAP标记神经干细胞、神经元和星形胶质细胞.结果:在悬浮培养情况下,三种培养条件均诱导所培养的细胞形成神经球,经染色鉴定神经球中的细胞均表达Nestin;其中DMEM/F12+ B27+ bFGF培养的神经干细胞增殖速度最快(P<0.01),Neurobasal+B27培养的神经干细胞增殖效率最高(P<0.01).在贴壁培养情况下,经染色鉴定,部分细胞表达β-TubⅢ或GFAP.结论:大脑皮层神经干细胞不适合贴壁培养,DMEM/F12+ B27+ bFGF条件适合大脑皮层神经干细胞体外增殖.