为研究以miRNA-21为靶标的反义核酸(AMO-miR-21)对淋巴瘤Raji细胞的生长抑制作用,使用Lipofectamine~(TM) 2000将化学合成的反义核酸转染Raji细胞,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法和台盼蓝拒染法检测细胞生长抑制率;实时定量PCR技术检测细胞miRNA-21水平改变;PI和AnnexinV双染,流式细胞仪检测细胞凋亡.结果显示转粢Raji细胞48~72 h,反义核酸组细胞生长受到明显抑制,反义核酸抑制细胞活性的最佳浓度是0.4 μmol/L;细胞内miRNA-21的表达水平明显下调;细胞凋亡明显增加;此外,反义组细胞中抑癌基因Pdcd4的mRNA和蛋白质呈高水平表达.提示以miRNA-21为靶标的反义核酸是人淋巴瘤Raji细胞生长的有效抑制剂和凋亡诱导剂.miRNA-21可能是淋巴瘤治疗的潜在靶标,其通过下调抑癌基因Pdcd4的表达水平发挥抗肿瘤作用.
作者:李育敏;董大伟;唐杰坷;霍毅民;王丽鹏;费嘉
来源:生命科学研究 2009 年 13卷 6期