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目的:研究KDR靶向RNA干扰对MCF-7细胞凋亡的影响,探讨其可能的机制.方法:采用阳离子脂质体Lipofectamine2000TM作为转染试剂将人KDR基因的siRNA转染人类乳腺细胞株MCF-7,诱RNAi,采用Hoechst33258染色和半定量RT-PCR检测Caspase.3、survivin的mRNA表达及细胞凋亡变化;比色法检测Caspase-3的活性;利用免疫组织化学方法检测survivin的表达,并用图像分析仪分析蛋白表达强度.结果:靶向KDR的siRNA转染MCF-7后,Caspase-3的mRNA表达上调,survivin基因mRNA及蛋白表达水平下调(P<0.05).结论:KDR siRNA通过减少乳腺癌细胞survivin的表达,增加Caspase-3表达来促进肿瘤细胞凋亡,发挥其抗肿瘤作用.

作者:许秀娥;徐宏伟;李泉;葛银林

来源:现代生物医学进展 2009 年 9卷 20期

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作者:
许秀娥;徐宏伟;李泉;葛银林
来源:
现代生物医学进展 2009 年 9卷 20期
标签:
siRNA MCF-7细胞 血管内皮生长因子受体2 凋亡 基因治疗 siRNA MCF-7 VEGFR-2 Apoptosis Gene therapy
目的:研究KDR靶向RNA干扰对MCF-7细胞凋亡的影响,探讨其可能的机制.方法:采用阳离子脂质体Lipofectamine2000TM作为转染试剂将人KDR基因的siRNA转染人类乳腺细胞株MCF-7,诱RNAi,采用Hoechst33258染色和半定量RT-PCR检测Caspase.3、survivin的mRNA表达及细胞凋亡变化;比色法检测Caspase-3的活性;利用免疫组织化学方法检测survivin的表达,并用图像分析仪分析蛋白表达强度.结果:靶向KDR的siRNA转染MCF-7后,Caspase-3的mRNA表达上调,survivin基因mRNA及蛋白表达水平下调(P<0.05).结论:KDR siRNA通过减少乳腺癌细胞survivin的表达,增加Caspase-3表达来促进肿瘤细胞凋亡,发挥其抗肿瘤作用.