目的:设计适用于Vero细胞微载体培养的化学成分明确无血清培养基.方法:以商品化的DMEM/F12合成培养基为基础培养基,应用Plackett-Burman实验设计和响应面分析法设计支持Vero细胞微载体培养的化学成分明确无血清培养基.结果:以细胞密度为评价指标,在单因素实验的基础上采用Plackett-Burman实验设计考察10种培养基添加成分对Vero细胞生长的影响,确定了3种对Vero细胞生长起明显促进作用的培养基添加成分,为胰岛素、血清素和腐胺.继而利用响应面法分析了这3种添加成分的最佳水平范围,设计了一种支持Vero细胞贴附培养的无血清培养基(VERO-SFM-A).在Belleo搅拌式培养瓶中采用VERO-SFM-A和Cytodex 1微载体培养Vero细胞,细胞密度由接种时的4× 105 cells/ml增加到培养6d后的22.3× 105 cells/ml,细胞活力保持在96%以上.结论:VERO-SFM-A能够有效地支持Vero细胞在微载体表面固定化生长并达到较高的细胞密度,具有实际应用于Vero细胞微载体规模化培养的应用潜力.
作者:刘红;陈天;李世崇;叶玲玲;王启伟;陈昭烈
来源:现代生物医学进展 2013 年 13卷 32期