目的:骨组织的形成是一个复杂的过程,受多种因素的影响,糖尿病所导致的持续高血糖对于成骨分化的影响机制尚不明确,以及在此分化过程中的各种细胞因子的作用机理仍不明了,现拟通过体外成骨诱导环境,观察高糖和碱性成纤维细胞生长因子(fibroblast growth factor bFGF)对人骨髓间充质干细胞(human mesenchymal stem cells hMSCs)成骨分化的影响.方法:hMSC在5.5mmol/L和25mmol/L葡萄糖浓度下培养6天,使用cck-8法测定各组细胞增殖情况;hMSC在两种糖浓度下成骨诱导28天,通过碱性磷酸酶(ALP)活性检测、茜素红染色、钙结节半定量检测,对比各组成骨分化活性;在两种糖浓度成骨诱导液中加入10 ng/ml bFGF,使用RT-PCR技术检测各组细胞OCN、OPN mRNA表达差异.结果:高糖较正常糖浓度细胞增殖率下降,ALP活性降低,茜素红染色钙结节量减少,RT-PCR检测结果显示25 mmol/L组OCN、OPN mRNA表达量低于5.5 mmol/L组,加入bFGF后,25 mmol/L组仍低于5.5 mmol/L组,与未添加bFGF同葡萄糖组比较表达增加.结论:高糖使hMSC增殖能力下降,在成骨分化的过程中ALP活性降低,成骨相关基因OCN、OPN表达量下降,证明了高糖对hMSC成骨分化具有抑制作用,当加入bFGF后,改善了高糖对hMSC的抑制作用,提示糖尿病条件下高糖的存在是导致hMSC成骨分化能力
作者:董淑凤;史久慧;王屹博;丁超;杜杰
来源:现代生物医学进展 2013 年 13卷 36期