目的:MicroRNA是近年发现的一类单链小分子RNA,对它的研究已成为一个新的热点.最近的研究发现,1et-7a在细胞内影响着基因的表达调控,在疾病发生中起着及极重要的作用,尤其是在肿瘤的发展过程中,let-7a扮演着不可替代的角色.本文主要研究let-7a在肾癌细胞株中的表达情况及其调控的靶基因、抑制细胞增殖的机制,对探索肾癌的致病基因,寻求肾癌新的治疗途径有重要意义.方法:应用化学合成的let-7a模拟物(mimics)用脂质体Lipofectamine 2000在体外瞬时转染786-O和Caki-1肾癌细胞株,转染48小时后采用荧光定量RT-PCR的方法检测let-7a及c-Myc、k-Ras mRNA的表达情况,Western blot检测这两株肾癌细胞转染了let-7a mimics后c-Myc及k-Ras蛋白的表达变化;转染let-7a mimics后分别在24、48、72小时三个时间点用CCK-8试剂盒检测对肾癌细胞株增殖的影响.结果:786-O和Caki-1肾癌细胞株中let-7a的表达量明显低于正常肾小管上皮细胞株HK-2 (P＜0.05);转染了let-7amimics的786-O和Caki-1肾癌细胞株,RT-PCR及Western blot结果显示c-Myc、k-Ras在基因及蛋白的表达水平明显下调(P＜0.05);CCK-8检测结果显示转染了let-7a mimics的肾癌细胞株细胞增殖能力明显明显受到抑制,与阴性对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论:Let-7a

作者：吴银霞；王业华；齐小康；顾沈阳；俞俊杰

来源：现代生物医学进展 2014 年 14卷 6期